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emma立夏

铁虫 (初入文坛)

[求助] 如何鉴别荧光蛋白的表达? 已有2人参与

各位伙伴帮帮忙~~~这里看过来!
本人是做pEGFP转化大肠杆菌的,在转化之后,涂在卡那板上。
有些文献说可以用肉眼能看到菌落发淡绿色发荧光,但是我的没有看到。后来我用了荧光显微镜观察,在紫外波长340nm激发下发蓝光,在450~480nm蓝光激发下发了黄绿光。但是,我用没有转入了GFP基因的大肠杆菌做对照组,发现也一样能看到菌体是发光的,所以我疑惑了。

求助大家,如何在显微镜下将转入了GFP与一般的细菌区分开来呢??

谢谢大家了~~~
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

显然是背景色,没有转成
4楼2014-02-26 10:00:28
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

荧光显微镜不是还可以看红光吗?好像是用Green看吧,你看下情况下是不是有红色荧光产生,如果有那就是你没做出来,这个是非特异。

从你说的看,感觉像是没有。
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
2楼2012-05-12 00:03:05
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loseing2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果和对照一样的那就是自发荧光,要绿色的比较亮才行
3楼2014-02-25 17:04:30
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