| 查看: 1971 | 回复: 12 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
shaoxin816银虫 (正式写手)
|
[求助]
【求助】藻类protein的测定
|
|
| 本人要测定螺旋藻中protein的含量，打算用SDS-PAGE或者Lowry法~问题来了，测定之前需要那些预处理？刚刚接触~不懂不懂。 |
回复此楼» 猜你喜欢
281求调剂（0805）
已经有8人回复
-
环境领域全国重点实验室招收博士1-2名
已经有3人回复
-
材料专硕306英一数二
已经有10人回复
-
301求调剂
已经有6人回复
-
一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂
已经有7人回复
-
302求调剂
已经有6人回复
-
26博士申请
已经有3人回复
-
268求调剂
已经有3人回复
-
311求调剂
已经有10人回复
-
被我言中：新模板不强调格式了，假专家开始管格式了
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请求鉴定藻类！！！
已经有9人回复
- 藻类如何鉴定？
已经有6人回复
- 【求助/交流】鉴定一下是什么藻类
已经有9人回复
- 【求助】藻类分析仪
已经有23人回复
- 微生物学考研资料1(沈萍版同步）免币分享
已经有67人回复
9楼2015-11-26 22:34:16
2楼2012-05-11 23:02:50
shaoxin816
银虫 (正式写手)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 598.8
- 散金: 2421
- 红花: 9
- 帖子: 531
- 在线: 189.4小时
- 虫号: 993171
- 注册: 2010-04-10
- 专业: 细胞周期与调控
3楼2012-05-14 16:46:36
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
shaoxin816: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢啦~~ 2012-05-14 19:56:59
shaoxin816: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢啦~~ 2012-05-14 19:56:59
|
2 细胞蛋白含量的测定 蛋白质测定采用考马氏亮蓝染色法，以牛血清清蛋白做标准物。 (1) 考马斯亮蓝G-250溶液的配制 准确称取100mg考马斯亮蓝G-250，溶于50mL95％乙醇中，加入85％磷酸100mL，用蒸馏水定容到lL，滤纸过滤后，保存于棕色瓶中。 (2) 蛋白质标准溶液的配制(100 ug／mL) 采用5mg/ml的标准牛血清白蛋白溶液，加蒸馏水溶解并定容，配制成100ug/ml。 (3) 标准曲线的制作 从100 ug/ml的蛋白质标准溶液中分别准确吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL于10ml试管中，并加入相应量的蒸馏水至1ml后加入5.0 mL考马斯亮蓝溶液充分混合，放置至少2 min，用l cm光径比色皿在595nm下测得溶液吸光度。以蛋白质浓度(C)为横坐标，以吸光度(A)为纵坐标，得出标准曲线为A=0.0081C+0.0024，R2=0.9978。 (4) 蛋白质含量的测定 准确吸取藻液5 mL，5000 r／min转速下离心10 min后，倒掉上清液，加入同等量0.1M的PBS。超声波破碎仪选择功率30%，Pause On 3 s, Pause Off 1s,冰浴。破碎完全后，5000 r／min转速下离心10min，取1 mL上清液，加入5mL考马斯亮蓝溶液，用1 mLPBS和5mL考马斯亮蓝混合溶液作对照，在595 nm波长下用紫外分光光度计测其吸光度值。根据标准曲线换算蛋白质的含量。 |
4楼2012-05-14 18:35:14
20