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A06060054

木虫 (正式写手)

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[交流] 细胞增值毒性试验IC50测定时药物加入浓度的问题

我现在正在测一种药物的半数抑制浓度IC50, 我看好多文献都说了，一般测IC50必须设置5个以上药物浓度梯度，每个浓度设3个复孔。假如我的实验设计中要求测定时药物浓度梯度设定为2，4，6，8，10，12 mmol/L，那么我的疑问是这个药物浓度应该是药物加入到细胞悬液之前的浓度还是加入到细胞悬液后的浓度。具体应该是以下哪种方案正确？
方案一：每孔加入细胞悬液90μL，每孔加入10μL 浓度分别为20，40，60，80，100，120 mmol/L的药物，这样药物的终浓度大约为2，4，6，8，10，12 mmol/L。
方案二：每孔加入细胞悬液100μL，每孔直接加入10μL 浓度分别为2，4，6，8，10，12 mmol/L的药物。
简单说，计算IC50时用的药物浓度是把药物加入细胞悬液之前的浓度还是加入之后的浓度？
备注疑点：好多文献都说一般96孔板加入细胞悬液100μL，加药是10μL，假如以方案一来为依据的话，药物加入后的终浓度就不好算了。

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