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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 愈伤污染
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欢仔

银虫 (正式写手)

[求助] 愈伤污染 已有1人参与

大家好，我想问下你们在做愈伤继代前，镊子这些工具都是怎么灭菌的，我以前都要高压灭菌，最近嫌蛮烦就没有灭菌，但在火上烧灼了很多遍，但是不知道为什么污染了很多，愈伤有一部分已经褐化了，不知道是不是因为镊子没有高压灭菌的原因，还是自己操作的时候不小心污染了，急需帮助啊，好不容易长出来的组织就褐化了，伤心
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勇于尝试新鲜事物
1楼 2012-05-08 10:22:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhangxiangyu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
13楼: Originally posted by 欢仔 at 2012-05-10 01:08:01:
嗯 ，瓶口是正对着风吗 是这个意思吗

如果风是从上向下，从中间向外面吹的，那么瓶口要斜向外并向上倾，但不能完全向外，你握瓶底的手不能和瓶口在同一条直线上，以免风将手上的污染物吹入瓶中。
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知识之败，慕虚名而不务潜修也；品节之败，慕虚荣而不甘枯淡也。
15楼2012-05-10 08:32:19
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普通回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
嗯..............
不太懂 以前做过一点 但我好像记得褐化现象应该不是污染吧 镊子不灭菌也没什么问题 我们都是火上灼烧至彤红彤红的 至少烧5分钟以上 最后算下来还不如灭菌后烧一两下省事...............
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Let God do with it as He wills
2楼2012-05-08 12:04:21
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-08 12:04:21:
嗯..............
不太懂 以前做过一点 但我好像记得褐化现象应该不是污染吧 镊子不灭菌也没什么问题 我们都是火上灼烧至彤红彤红的 至少烧5分钟以上 最后算下来还不如灭菌后烧一两下省事...............

哦 呵呵主要是我的培养基颜色发黄，正常的都是白色的，发黄的培养基上的愈伤褐化很严重 所以就觉的是污染了
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勇于尝试新鲜事物
3楼2012-05-09 00:04:52
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Crescendo

铁杆木虫 (著名写手)
最近也在搞。因为没有组培室，污染有时严重。
希望交流。
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日拱一卒，功不唐捐
4楼2012-05-09 09:35:16
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淘气维尼89

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也做愈伤的继代，一般只要把镊子烧两分钟就行了，避免污染还有其他的方面要注意，尤其是皮肤上的细菌比较多，不要接触培养瓶。愈伤发生褐变，应该不是污染的原因，褐变原因有很多，有培养基成分和培养条件的影响等，你可以搜一篇关于褐变的论文看看。
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5楼2012-05-09 09:39:06
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h152139

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
镊子手术刀等铁制的工具，灼烧就可以了。你可以把装75%酒精的，瓶子放在旁边，不用的时候把几个工具泡在里面，用的时候拿出来烧一下就OK了。被污染肯定是操作的时候，哪里不合适。褐化原因挺多的，随便找篇文章看下就知道了，一般是在培养基里面加入活性炭或者Vc就行。也有可能是培养基中的某个激素的量也可能导致褐化！
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选择生物坚持到底！
6楼2012-05-09 14:40:02
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dazey

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
LZ是否没等镊子凉透了就用，被烫死也有可能哦，换培养及时速度尽量快，褐化不是因为污染的
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7楼2012-05-09 15:42:46
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zhangxiangyu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
愈伤组织继代是时候镊子可以高压灭菌也可以不用高压灭菌，如果不高压灭菌的话可以将其放入75%的乙醇水溶液中泡着，接种时在酒精灯上灼烧，然后将准备夹愈伤组织的一头插入培养基中冷却（当然也可以直接在空气中冷，但这样比较慢），然后就可以继代了，但是要注意操作，拿镊子的手一定不能接触瓶口或者在瓶口处抖动，这样容易进细菌，注意瓶口向外（根据超净工作台的风向来定）
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知识之败，慕虚名而不务潜修也；品节之败，慕虚荣而不甘枯淡也。
8楼2012-05-09 19:20:03
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zhangxiangyu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

培养基发黄有可能是你所用的琼脂有问题，检查是否过期。
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知识之败，慕虚名而不务潜修也；品节之败，慕虚荣而不甘枯淡也。
9楼2012-05-09 19:21:13
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 淘气维尼89 at 2012-05-09 09:39:06:
我也做愈伤的继代，一般只要把镊子烧两分钟就行了，避免污染还有其他的方面要注意，尤其是皮肤上的细菌比较多，不要接触培养瓶。愈伤发生褐变，应该不是污染的原因，褐变原因有很多，有培养基成分和培养条件的影响 ...

嗯 为了安全起见 我烧了好多遍 呵呵 污染那批愈伤很惨烈 好不容易诱导出愈伤组织了 结果污染了  那批大多培养基都发黄  还有味道 不知道在哪一步污染了
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勇于尝试新鲜事物
10楼2012-05-10 01:04:56
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