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slshihao

木虫 (小有名气)


[交流] 新手请教分离黄酮

分离新手,想请教一各位怎么分离黄酮单体。已经有70%左右的总黄酮,水溶性不好,用甲醇可以溶掉,设备有硅胶、聚酰胺、中压制备、ODS。
应该如何下手,要先用硅胶或聚酰胺粗分几段,如果要分成几段,是按照极性分段?然后上中压制备吗?
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slshihao

木虫 (小有名气)


引用回帖:
6楼: Originally posted by vivid2008 at 2012-05-07 14:50:56:
首先一点:含量已经在70%左右,这个含量你是怎么测得的?
聚酰胺主要是官能团富集黄酮类化合物,对分段没有明显的作用。
可以通过大小不同的硅胶柱再分分段,然后上中压制备,然后再液相制备等。

硝酸铝显色,紫外测吸光度测得的含量,大小不同的硅胶柱是什么意思?
8楼2012-05-07 16:57:34
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shihao611

禁虫 (知名作家)

★ ★
slshihao(金币+1): 谢谢参与
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-05-07 12:27:49
本帖内容被屏蔽

2楼2012-05-07 11:28:47
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vivid2008

银虫 (初入文坛)



slshihao(金币+1): 谢谢参与
首先一点:含量已经在70%左右,这个含量你是怎么测得的?
聚酰胺主要是官能团富集黄酮类化合物,对分段没有明显的作用。
可以通过大小不同的硅胶柱再分分段,然后上中压制备,然后再液相制备等。
6楼2012-05-07 14:50:56
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xionghui

新虫 (小有名气)



slshihao(金币+1): 谢谢参与
我习惯先用硅胶柱分段,正反相硅胶,后上凝胶,最后做制备HPLC
7楼2012-05-07 15:33:54
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slshihao

木虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by xionghui at 2012-05-07 15:33:54:
我习惯先用硅胶柱分段,正反相硅胶,后上凝胶,最后做制备HPLC

按照什么分段?
9楼2012-05-07 17:02:10
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qiute621

铜虫 (著名写手)



slshihao(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
9楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 17:02:10:
按照什么分段?

不同比例流动相点薄层板,显色后根据分离度砍段
10楼2012-05-07 17:40:02
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qiute621

铜虫 (著名写手)


引用回帖:
8楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 16:57:34:
硝酸铝显色,紫外测吸光度测得的含量,大小不同的硅胶柱是什么意思?

就是用不同的硅胶目数上不同的径高比柱子,用不同的流动相比例或系统进行砍段
11楼2012-05-07 17:42:45
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syhorchid

木虫之王 (文学泰斗)



slshihao(金币+1): 谢谢参与
建议先用聚酰胺进行粗分!
12楼2012-05-07 17:56:13
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linxi5925

至尊木虫 (知名作家)



slshihao(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主。。。。。。。。
14楼2012-05-07 18:21:08
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ninujuki

禁虫 (小有名气)


slshihao(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽

17楼2012-05-07 20:50:35
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wxykf

铜虫 (小有名气)



slshihao(金币+1): 谢谢参与
很多柱材料都能分开的,让你导师多告诉你几个方法
18楼2012-05-07 21:11:33
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slshihao

木虫 (小有名气)


引用回帖:
17楼: Originally posted by ninujuki at 2012-05-07 20:50:35:
你说的这几种填料作用都不同,看你想怎么分了,按极性的话就主要用硅胶柱分,凝胶柱是按分子大小分离的。其实聚酰胺对黄酮的分离效果是很好的,你可以先用聚酰胺粗分,然后再根据情况用凝胶或硅胶。因为硅胶有死吸 ...

实验室没有凝胶,可以聚酰胺粗分然后用ODS分吗
19楼2012-05-08 08:51:28
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vivid2008

银虫 (初入文坛)


引用回帖:
8楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 16:57:34:
硝酸铝显色,紫外测吸光度测得的含量,大小不同的硅胶柱是什么意思?

就是大小粗细不一样的硅胶柱呀。不过更建议用聚酰胺富集后再用凝胶柱除下杂,然后再上中压制备和制备液相
20楼2012-05-08 09:24:38
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slshihao

木虫 (小有名气)


引用回帖:
20楼: Originally posted by vivid2008 at 2012-05-08 09:24:38:
就是大小粗细不一样的硅胶柱呀。不过更建议用聚酰胺富集后再用凝胶柱除下杂,然后再上中压制备和制备液相

谢谢了,我也想先用过聚酰胺的,但是用什么洗脱剂比较好,甲醇水梯度洗吗
21楼2012-05-08 09:41:40
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vivid2008

银虫 (初入文坛)


引用回帖:
21楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-08 09:41:40:
谢谢了,我也想先用过聚酰胺的,但是用什么洗脱剂比较好,甲醇水梯度洗吗

用乙醇水梯度洗脱
22楼2012-05-08 15:06:58
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xionghui

新虫 (小有名气)


引用回帖:
9楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 17:02:10:
按照什么分段?

点板,看薄层再分段,一定要成点才好合并分段。不是黄酮苷应该好成点
23楼2012-05-08 19:14:59
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slshihao

木虫 (小有名气)


引用回帖:
22楼: Originally posted by vivid2008 at 2012-05-08 15:06:58:
用乙醇水梯度洗脱

为什么用乙醇水呢,还有梯度一般应该怎么设,要在之前点板确定吗
24楼2012-05-09 12:26:46
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meteord

木虫 (正式写手)



slshihao(金币+1): 谢谢参与
聚酰胺富集,乙醇洗脱,可以自设梯度,我之前富集用过60%的。
25楼2012-05-09 13:33:04
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简单回复
2012-05-07 12:11   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
祝福
skymao0074楼
2012-05-07 12:33   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
xiejf5楼
2012-05-07 12:49   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
20091262213楼
2012-05-07 18:02   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
祝福
Patent_16615楼
2012-05-07 18:25   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
102583601816楼
2012-05-07 18:45   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
cfly26楼
2012-05-09 16:38   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
2012-05-09 18:53   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
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