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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 新手请教分离黄酮
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slshihao

木虫 (小有名气)

[交流] 新手请教分离黄酮

分离新手，想请教一各位怎么分离黄酮单体。已经有70%左右的总黄酮，水溶性不好，用甲醇可以溶掉，设备有硅胶、聚酰胺、中压制备、ODS。
应该如何下手，要先用硅胶或聚酰胺粗分几段，如果要分成几段，是按照极性分段？然后上中压制备吗？
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1楼 2012-05-07 10:50:39
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shihao611

禁虫 (知名作家)
★ ★
slshihao(金币+1): 谢谢参与
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-05-07 12:27:49
本帖内容被屏蔽
2楼2012-05-07 11:28:47
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vivid2008

银虫 (初入文坛)
★
slshihao(金币+1): 谢谢参与
首先一点：含量已经在70%左右，这个含量你是怎么测得的？
聚酰胺主要是官能团富集黄酮类化合物，对分段没有明显的作用。
可以通过大小不同的硅胶柱再分分段，然后上中压制备，然后再液相制备等。
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6楼2012-05-07 14:50:56
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xionghui

新虫 (小有名气)
★
slshihao(金币+1): 谢谢参与
我习惯先用硅胶柱分段，正反相硅胶，后上凝胶，最后做制备HPLC
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7楼2012-05-07 15:33:54
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slshihao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by vivid2008 at 2012-05-07 14:50:56:
首先一点：含量已经在70%左右，这个含量你是怎么测得的？
聚酰胺主要是官能团富集黄酮类化合物，对分段没有明显的作用。
可以通过大小不同的硅胶柱再分分段，然后上中压制备，然后再液相制备等。

硝酸铝显色，紫外测吸光度测得的含量，大小不同的硅胶柱是什么意思？
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8楼2012-05-07 16:57:34
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slshihao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xionghui at 2012-05-07 15:33:54:
我习惯先用硅胶柱分段，正反相硅胶，后上凝胶，最后做制备HPLC

按照什么分段?
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9楼2012-05-07 17:02:10
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qiute621

铜虫 (著名写手)
★
slshihao(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
9楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 17:02:10:
按照什么分段?

不同比例流动相点薄层板，显色后根据分离度砍段
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10楼2012-05-07 17:40:02
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qiute621

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 16:57:34:
硝酸铝显色，紫外测吸光度测得的含量，大小不同的硅胶柱是什么意思？

就是用不同的硅胶目数上不同的径高比柱子，用不同的流动相比例或系统进行砍段
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11楼2012-05-07 17:42:45
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syhorchid

木虫之王 (文学泰斗)
★
slshihao(金币+1): 谢谢参与
建议先用聚酰胺进行粗分！
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12楼2012-05-07 17:56:13
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linxi5925

至尊木虫 (知名作家)
★
slshihao(金币+1): 谢谢参与
祝福楼主。。。。。。。。
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14楼2012-05-07 18:21:08
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ninujuki

禁虫 (小有名气)
★
slshihao(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽
17楼2012-05-07 20:50:35
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wxykf

铜虫 (小有名气)
★
slshihao(金币+1): 谢谢参与
很多柱材料都能分开的，让你导师多告诉你几个方法
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18楼2012-05-07 21:11:33
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slshihao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by ninujuki at 2012-05-07 20:50:35:
你说的这几种填料作用都不同，看你想怎么分了，按极性的话就主要用硅胶柱分，凝胶柱是按分子大小分离的。其实聚酰胺对黄酮的分离效果是很好的，你可以先用聚酰胺粗分，然后再根据情况用凝胶或硅胶。因为硅胶有死吸 ...

实验室没有凝胶，可以聚酰胺粗分然后用ODS分吗
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19楼2012-05-08 08:51:28
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vivid2008

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 16:57:34:
硝酸铝显色，紫外测吸光度测得的含量，大小不同的硅胶柱是什么意思？

就是大小粗细不一样的硅胶柱呀。不过更建议用聚酰胺富集后再用凝胶柱除下杂，然后再上中压制备和制备液相
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20楼2012-05-08 09:24:38
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slshihao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
20楼: Originally posted by vivid2008 at 2012-05-08 09:24:38:
就是大小粗细不一样的硅胶柱呀。不过更建议用聚酰胺富集后再用凝胶柱除下杂，然后再上中压制备和制备液相

谢谢了，我也想先用过聚酰胺的，但是用什么洗脱剂比较好，甲醇水梯度洗吗
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21楼2012-05-08 09:41:40
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vivid2008

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-08 09:41:40:
谢谢了，我也想先用过聚酰胺的，但是用什么洗脱剂比较好，甲醇水梯度洗吗

用乙醇水梯度洗脱
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22楼2012-05-08 15:06:58
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xionghui

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 17:02:10:
按照什么分段?

点板，看薄层再分段，一定要成点才好合并分段。不是黄酮苷应该好成点
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23楼2012-05-08 19:14:59
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slshihao

木虫 (小有名气)
引用回帖:
22楼: Originally posted by vivid2008 at 2012-05-08 15:06:58:
用乙醇水梯度洗脱

为什么用乙醇水呢，还有梯度一般应该怎么设，要在之前点板确定吗
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24楼2012-05-09 12:26:46
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meteord

木虫 (正式写手)
★
slshihao(金币+1): 谢谢参与
聚酰胺富集，乙醇洗脱，可以自设梯度，我之前富集用过60%的。
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25楼2012-05-09 13:33:04
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sesame_oil3楼
2012-05-07 12:11   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
祝福
skymao0074楼
2012-05-07 12:33   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
xiejf5楼
2012-05-07 12:49   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
20091262213楼
2012-05-07 18:02   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
祝福
Patent_16615楼
2012-05-07 18:25   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
102583601816楼
2012-05-07 18:45   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
cfly26楼
2012-05-09 16:38   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
li40737424427楼
2012-05-09 18:53   回复  
slshihao(金币+1): 谢谢参与
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