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hxjhxj

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2.5
帖子: 25
在线: 6.5小时
虫号: 1151553
注册: 2010-11-20
专业: 食品科学基础

[求助] 多糖酶解 HPLC 去酶已有2人参与

急求！！！
我对提取的多糖进行了酶解，之后要用HPLC对水解后得到的寡糖进行分析。但是担心加入的酶试剂会影响HPLC的分析。一方面担心酶会不会堵柱子，还有一方面担心酶的峰会不会影响寡糖峰。
0.22的膜能过掉纤维素酶么？如果不能我该怎么出去这部分酶呢？它的存在会不会影响我的多糖酶解结果分析。
我考虑过sevage去蛋白，但是那样之后要进行透析，我担心透析的过程会把水解得到的寡糖去掉了。
有没有哪位前辈做过多糖酶解后HPLC分析的，可以给一些意见么？

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1楼2012-05-02 20:26:33

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liweixiaoye

至尊木虫 (著名写手)

正股级巡视员

食品EPI: 1
应助: 27 (小学生)
金币: 12955.8
红花: 14
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在线: 380小时
虫号: 395971
注册: 2007-06-08
性别: GG
专业: 食品科学基础

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
hxjhxj(zybpxy代发): 金币+5 2014-08-17 10:23:28

你可以考虑按照以下方法解决：
1）如果你是酶解样品，pH在中性范围，可以用95摄氏度加热5min灭活，15000g离心15min或0.22微米水洗滤膜过滤进样；
2）如果你是酶解样品，pH在酸性（小于3）或碱性（大于10）范围，则不能加热，需要调节至中性再按照1）中处理；
如果单纯使用0.22微米滤膜无法将没进行有效过滤，气质可以过滤菌体或与之相似大小物质。