| 查看: 2873 | 回复: 23 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
liuxueyan21金虫 (小有名气)
|
[求助]
考马斯亮蓝法测定蛋白过程中的问题
|
|
|
各位师兄师姐，紧急求助，就是用考马斯亮蓝法测定土壤蛋白，但是不管是预实验还是正式试验，测定的结果并不相同，尽管重复了很多次，不知道问题出哪里了？忘各位师兄师姐帮帮忙。 1、标准曲线时，BSA是需要每次测定都要重新配制吗？在测样品的时候是直接加100ul待测样品，其他与标准曲线一样。 2、提取的土壤蛋白储存在4°冰箱中，放置一个礼拜左右，对测定结果有影响么？还是会有蛋白变性的可能性？还是提取完成后放置在-20°条件？ 3、考马斯染液反应时间为10min，并在一个小时之内测定完成，这个时间是不是有问题？ |
回复此楼» 猜你喜欢
孩子确诊有中度注意力缺陷
已经有12人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有3人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有4人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
-
AI论文写作工具：是科研加速器还是学术作弊器？
已经有3人回复
-
2026博士申请-功能高分子，水凝胶方向
已经有6人回复
-
论文投稿，期刊推荐
已经有4人回复
-
硕士和导师闹得不愉快
已经有13人回复
-
请问2026国家基金面上项目会启动申2停1吗
已经有5人回复
-
同一篇文章，用不同账号投稿对编辑决定是否送审有没有影响？
已经有3人回复
kedaxiaoyu
木虫 (职业作家)
神虫浮云
- 应助: 84 (初中生)
- 金币: 4809.5
- 散金: 776
- 红花: 19
- 沙发: 110
- 帖子: 3858
- 在线: 2108.7小时
- 虫号: 1675631
- 注册: 2012-03-08
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
liuxueyan21: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-12 17:17:16
liuxueyan21: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-06-12 17:17:16
| 蛋白的浓度测定需要在标曲的范围内，超过范围后测定的数值误差大的就失去参考价值了。加50ul和加100ul其实是一样的，浓度不在标曲范围内需要稀释后再取100ul测定会准确些。 |
liuxueyan2112楼2012-06-12 15:08:00
suruijing
木虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 3750.1
- 散金: 777
- 红花: 2
- 帖子: 808
- 在线: 422.1小时
- 虫号: 1087003
- 注册: 2010-09-01
- 性别: MM
- 专业: 污染控制化学
2楼2012-06-05 19:01:56
【答案】应助回帖
★
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-05 22:19:17
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-05 22:19:17
| 4度放置时间长了肯定有问题，这个温度下有一部分蛋白酶还是有活性的。土壤中的其他物质有可能对考染的结果产生影响。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
3楼2012-06-05 21:27:06
gywyl1977
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 2
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 2590.7
- 红花: 3
- 帖子: 548
- 在线: 41.6小时
- 虫号: 1631149
- 注册: 2012-02-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
【答案】应助回帖
★
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块^_^ 2012-06-08 10:27:59
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块^_^ 2012-06-08 10:27:59
|
1) BSA需要一批多配些，分装在棕色瓶中，4度保存。做标准曲线不需要每次都重配，但做好每一瓶做好标准曲线后尽快用掉。启用另一瓶时，如果间隔时间长，需要重新做标准曲线； 2）蛋白提取后肯定要冷冻保存。 3）显色反应一般都在半小时以内。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
4楼2012-06-06 00:35:09