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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 对未知野生质粒如何确定它是否带抗性基因
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匿名

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1楼2012-05-01 14:33:13
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张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-03 13:30:44
爱加Audrey: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-05-05 19:31:05
把你的质粒扩大培养，提取出来，转到大肠E.coli DH-5α或者是E.coli Top10（或其他别的什么没有抗性的大肠）里，因为这菌是没有什么抗性的，如果你质粒上有这个抗性就会在抗性板上长。如果有这个抗性，你可以pcr验证是否有那个抗性，但是如果你设计引物什么的去验证，还不如直接测序快。
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未来不是梦
5楼2012-05-02 20:20:54
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cheng_xiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-02 13:43:33
爱加Audrey: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-05-05 19:30:22
这个啊，一般把菌放到带各种霉素的培养基中培养，看能不能生长，这是老办法，像氨苄霉素，链霉素等。但你要是一株野生菌的话，估计这些抗性都有，你先试一下也行
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我努力我奋斗我成功
2楼2012-05-01 14:42:45
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匿名

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3楼2012-05-01 23:35:40
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 爱加Audrey at 2012-05-01 23:35:40:
继续等人回帖，把菌放到各种抗生素中培养，如果长了，证明其中可能含有抗性基因。那下一步该怎么进行确认呢？因为有可能抗性基因不在这个质粒上，而在染色体基因组上。

下一步把质粒拿去测序或者PCR证实。
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4楼2012-05-02 13:25:47
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