24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 2317  |  回复: 13

emma立夏

铁虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 世外清风 at 2012-05-02 08:23:32:
先测序看看吧,这样无谓的重复,不仅是对金钱的浪费,也浪费了最宝贵的时间和意志!PCR的假阳性率很高,不要太相信PCR,关键还是酶切,你可以用T载体上的酶切位点切切看,看是不是连入东西了!祝好运!

谢谢你的意见,但是由于我用的是pMD-18Tsimple vector。没有多克隆位点的。所以我只能用我片段上的酶切位点了。
11楼2012-05-07 19:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

emma立夏

铁虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by post_ngao at 2012-05-02 20:14:59:
这种情况必须果断测序,否则一直盲做更加费钱,还费时费力。时间才是最宝贵的,一切能够用钱解决的问题都不是问题。

对的,大家都是建议测序,我也打算马上测序了,谢谢你的回复。
12楼2012-05-07 19:51:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

emma立夏

铁虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by huguangdong at 2012-05-03 09:50:41:
你这个问题和保护碱基没关系,连接到T载体酶切效果比加保护碱基要好很多。PCR用的是TAQ酶吧?如果是,就直接做TA克隆,用的是哪个公司的酶?酶切效率也是问题,再就是看看水浴锅温度,用温度计测一下。还有你说你 ...

都是用TAKARA的,pcr mix ,酶也都是用的takara~~~谢谢你的提议~!!
13楼2012-05-07 21:08:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

琼Echo

新虫 (初入文坛)

嘿,你好,现在我双酶切也遇到了跟你一样的问题,PCR检测到阳性提质粒后20微升体系酶切也切不开,送去测了一个反应,上游酶切位点没有问题,目的片段也连上了,但发现pMD19T测的那部分序列很乱(这不排除测序两端不准的可能性),但我想这应该不会造成酶切不开、、、、接下来可能需要先单酶切看看能切开否?   
看到你的帖子,所以就想问一下你的问题现在解决没有,切开了吗?
谢谢你!
恋着拟南芥的菇凉
14楼2013-10-30 17:31:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 emma立夏 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +21 luoziheng 2026-04-10 23/1150 2026-04-14 15:49 by zs92450
[考研] 296求调剂 +8 汪!?! 2026-04-09 9/450 2026-04-14 15:15 by 逆水乘风
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-09 12/600 2026-04-12 10:32 by 逆水乘风
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-08 9/450 2026-04-12 02:24 by 秋豆菜芽
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +5 安小满zzz 2026-04-08 5/250 2026-04-12 00:41 by 蓝云思雨
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +6 青灯不负 2026-04-09 6/300 2026-04-11 20:35 by dongdian1
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 11/550 2026-04-11 19:57 by 逆水乘风
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 农业管理302分求调剂 +3 xuening1 2026-04-10 3/150 2026-04-11 10:18 by zhq0425
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
[论文投稿] 求助文献原文 10+3 18500821399 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:56 by 北京莱茵润色
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
信息提示
请填处理意见