5楼: Originally posted by 世外清风 at 2012-05-02 08:23:32:
先测序看看吧，这样无谓的重复，不仅是对金钱的浪费，也浪费了最宝贵的时间和意志！PCR的假阳性率很高，不要太相信PCR，关键还是酶切，你可以用T载体上的酶切位点切切看，看是不是连入东西了！祝好运！

7楼: Originally posted by post_ngao at 2012-05-02 20:14:59:
这种情况必须果断测序，否则一直盲做更加费钱，还费时费力。时间才是最宝贵的，一切能够用钱解决的问题都不是问题。

8楼: Originally posted by huguangdong at 2012-05-03 09:50:41:
你这个问题和保护碱基没关系，连接到T载体酶切效果比加保护碱基要好很多。PCR用的是TAQ酶吧？如果是，就直接做TA克隆，用的是哪个公司的酶？酶切效率也是问题，再就是看看水浴锅温度，用温度计测一下。还有你说你 ...