应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » pET28a基因重组问题
31/1返回列表
查看: 528  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

guozejing

银虫 (小有名气)

[交流] pET28a基因重组问题

克隆基因起始密码子前面还有30多个碱基,用EcoI和HindIII酶解，插入pET28a,转入BL21(DE3)，那30多个碱基翻译成氨基酸吗？pET28a的N-端和C-端都有6个His标签，并且N-端还有T7标签，翻译后的蛋白两端都有His标签及T7标签吗？并且在标签序列之间还有一些其他的限制酶切位点的碱基，也会翻译成相应的氨基酸吗？如果有的话我的重组蛋白两端就会有了一些多余的氨基酸序列，和原始菌株的蛋白比又会有哪些方面的差异（如等电点，疏水性，亚细胞定位等）？（该蛋白通过实验证实能被Ni柱较好的吸附，并具较好活性）请各位同仁指点。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-04-29 10:56:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0008meng

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2012-07-12 23:29:59
载体上不是有T7启动子吗，加入IPTG诱导，它就会表达了。
多出的一段标签，我觉得对整个蛋白质的构象、功能应该影响不大。并不会影响到活性中心。
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-12 22:23:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
longdlut2楼
2012-05-03 12:03   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 guozejing 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭