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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 试剂盒提取的DNA,PCR产物黑色
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小冯一刀

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 试剂盒提取的DNA,PCR产物黑色

我用生工的试剂盒提植物DNA,PCR之后产物是黑色的，不知道什么原因，请教。
附DNA提取步骤：加入100 μl Qlysis-P Reagent，震荡混匀，85°C水浴20 min；水浴后向离心管中加入100 μl Buffer NST ，震荡混匀；离心：12,000 rpm室温离心5 min。
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1楼 2012-04-27 22:37:33
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-28 09:31:30
提取的DNA是溶解在什么里的？
PCR体系是一直用的？一般25ul体系里才放1ulDNA溶液，变黑的原因不大可能是与这个有关吧
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2楼2012-04-28 09:04:32
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小冯一刀

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gaoyang636 at 2012-04-28 09:04:32:
提取的DNA是溶解在什么里的？
PCR体系是一直用的？一般25ul体系里才放1ulDNA溶液，变黑的原因不大可能是与这个有关吧

溶在BUFFER里的啊，按试剂盒说明来的么，
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3楼2012-04-28 18:44:54
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小冯一刀

铁杆木虫 (正式写手)
体系一直用的，放2UL模版啊，第一次扩出来黑色的产物
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4楼2012-04-28 18:46:43
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-29 17:35:59
小冯一刀: 金币+3, ★有帮助 2012-05-03 23:12:24
你再做一次呗，这次设置对照，比如：
再放上两管 不含DNA的；如果有兴趣，可以把你PCR体系中出现的所有东西，都设置一个阴性对照。
如果发现的确是由于放了这批DNA，可以再试试只放这个所谓的buffer，看看是不是它的原因？
遇上这么灵异的事情，一定要搞清楚啊。整天波澜不惊的实验我都麻木了
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5楼2012-04-29 15:54:51
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