应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 普通的液相色谱柱子C18 5微米，用来分离蛋白质会怎么样？
181/2返回列表12下一页
查看: 5275  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

songzi136

金虫 (正式写手)

[交流] 普通的液相色谱柱子C18 5微米，用来分离蛋白质会怎么样？ 已有17人参与

普通的液相色谱柱子C18 5微米，用来分离蛋白质会怎么样？

        现有一个分子量7万左右的蛋白，我想知道普通的HPLC C18 色谱柱（5微米，非蛋白专用柱），因为没钱买蛋白专用柱。

        如果将含有此蛋白的溶液进入色谱柱。

结果会是怎样的：

1.蛋白会很快流出色谱柱？

2.还是会留在色谱柱前面？

3.一般的蛋白质在5%的甲醇中会不会变性？

4.堵柱子的可能性有多大？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-04-27 16:56:59
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mikeliubao

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
soundhorizo: 金币+3, 感谢参与~ 欢迎常来分析版~ ^^ 2012-04-28 19:40:15
首先做蛋白的C18与粒径大小关系不大，要选在孔径大的C18柱，越大分子量需要越大的孔径柱子。

其次，蛋白质样品一般不能溶解在甲醇中，要用乙腈溶解，一般蛋白质在乙腈的溶解度比甲醇高。包括流动相，也要用乙腈。一般还要加三氟乙酸形成离子对增加蛋白质在C18上的保留。所以，一般C18对蛋白的保留性能差，不会被吸附在C18颗粒上，除非堵在柱头或由于流动相性质改变而造成蛋白沉淀在C18颗粒之间。

还有，你用梯度程序初始状态下的流动相配比来溶解样品，溶解后用高速离心机离心（4000-5000g），之后抽取中间的溶液上你现有C18柱试试看能不能分离，如果可以，就不用买柱子了。
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2012-04-28 10:25:02
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

巫女子佩

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
普通柱子肯定会堵的，柱残留也可能很高，几下就不能用了，至于说分离好不好那就另说了。
其实国产有很好的聚合物填料的柱子，专门为蛋白质准备的，分离又快又好，价格比你毁一个C18可能还低，C18是通用型柱子，爱惜着点以后分很多小分子还可以用的，何苦因为一次试验就全毁了。跟你老板商量一下呗。
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2013-10-10 15:58:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lanpishu23

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
408851978: 金币+1 2012-04-28 06:23:28
估计进去就把柱子给堵了，要买大粒径的柱子，做蛋白质要凝胶柱吧
赞一下 回复此楼
没有最好，只有更好
2楼2012-04-27 19:22:53
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzhwin

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
408851978: 金币+1 2012-04-28 06:23:20
同楼上
C18柱子不能分析蛋白的，直接堵住
赞一下 回复此楼
3楼2012-04-28 01:37:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sp_312

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
凝胶色谱、反相色谱、亲和色谱、离子色谱都可以。C18当然也可以，不过你得选择孔径大些的比如300A。。。可以直接咨询色谱柱供应商
赞一下 回复此楼
4楼2012-04-28 09:34:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwei10987

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蛋白质需要用凝胶柱分离。
赞一下 回复此楼
5楼2012-04-28 09:36:14
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swt1898

铁虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蛋白质和多肽可以用Bio-C18色谱柱，专门做大分子的
赞一下 回复此楼
6楼2012-04-28 10:13:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pfizer2001

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蛋白分析RP柱子当然可以，但是孔径一般都是300A的
你的这样的分子量的很少用RP 一般用凝胶柱子
省钱去分离蛋白似乎很难 柱子很贵的
赞一下 回复此楼
8楼2012-04-28 17:36:08
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifucheng

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
估计很难啊 要不借一只凝胶柱吧
赞一下 回复此楼
9楼2012-04-28 18:58:39
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

padodo

至尊木虫 (职业作家)

胖嘟嘟

优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
蛋白质需要先变性（使用含TFA的流动相），然后使用大孔径的柱子
否则的话，堵你不商量
赞一下 回复此楼
我有什么能帮助您的吗？
10楼2012-04-28 20:19:47
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 songzi136 的主题更新
181/2返回列表12下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 19:34 by lXgU0RvNTDC9
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 19:31 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 8/400 2026-08-23 18:58 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 18:46 by lXgU0RvNTDC9
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 3/150 2026-08-23 16:30 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 15:33 by KM5EcsNQRBPn
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 4/200 2026-08-23 15:30 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +15 羊腰板 2026-08-21 16/800 2026-08-23 10:45 by process2012
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭