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关于植物激素提取液过C18小柱 已有2人参与
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近来,很多虫友问如何提取植物内源激素,我已经发布了一个帖子http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4431521&pid=1&page=1#pid1, 还有一些虫友问道激素提取液过C18小柱的细节,呵呵,这是我的疏忽,没有上传细节,本来我觉得这都不成问题的,说穿了是非常简单的,可能对于第一次测定激素的觉得有点难度, 具体是:用一次性针管抽取上清液,然后加压注入到C18小柱中,收集过滤后样品氮气吹干就可以了。 但是,这有个前提,那就是你所有的样品中不含有油分,如果样品是种子,比如大豆等含油量搞的器官,可以在上清液过C18固相萃取柱后,用氮气吹去滤液中的甲醇,残余液中加入2ml磷酸缓冲液并用1mol.L-1HCl盐酸调pH值2.5~2.8之间,并以与水溶液等体积的乙酸乙酯萃取,收集有机相,取水相再用乙酸乙酯萃取2次。合并乙酸乙酯溶液。此时, ABA、GA3、IAA存在于乙酸乙酯中,用氮气吹干溶剂,样品稀释液定容。 示意图如下: 植物内源激素提取上清液过柱示意图,仅供参考 |
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