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晏育伟

铜虫 (初入文坛)


[求助] 细胞裂解缓冲液的配制?求助各位大虾

Sample Text
细胞裂解缓冲液
10mmol/l Tris-cl(PH8.0)
1mmol/l EDTA(PH8.0)
0.1%(m/V)SDS   
这是分子克隆实验指南里面的一种缓冲液配方,用来提取动物基因组DNA,求教各位大虾,这是分开单独配还是混在一起配?分开单独配的话,那各自的量又是加多少?混一起配的话那具体是怎么配了?第一次做实验,实在搞不明白,请各位高手指教一下,不胜感激。。。。。。。。
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+4, 鼓励发帖交流问题。 2012-04-26 18:10:05
晏育伟: 金币+2, ★★★很有帮助, 很详细,谢啦。我按你说的方法去配。 2012-04-27 10:20:36
嗯...........
是这样的,肯定需要混在一起配制,若你分开单独配制,必需先配成母液后混合,而短期使用的话,没有必要配成母液。
假设你需要1L这样的裂解液,在800mL的蒸馏水中溶解浓度为10mmol/L(具体添加多少g,你要自己算,我直接说只能是教懒人咯)的Tris,用市售盐酸调pH到8.0后,添加EDTA(或EDTA.2Na也可,没有区别),量同样你自己算,强烈搅拌完全溶解后,添加SDS至文中要求浓度,慢速搅拌至溶解(强烈搅拌会产生大量泡沫)
室温放置就可以了
祝实验顺利,若有说错请高手指点
Let God do with it as He wills
2楼2012-04-26 16:46:36
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