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kardinalxing

木虫 (正式写手)

半猪半虎

[求助] 反相分离化合物

以前没用过反相  
想请教下用过的虫友就是常压的ODS柱分离什么情况下的化合物效果比较好呢?
现在分离的样品点板时,显示的主斑点有至少4个,而且是一个挨一个的,过常规的硅胶柱很不好分,是不是反相的效果会好一些呢?反相的原理应该也是极性大小吸附的吧,正相不太好分,反相会怎么样呢?
补充下:这些化合物的极性都不算太小,大约是氯仿甲醇比例在10:1条件下冲下来的 ,反相死吸附应该不是很大影响。
谢谢!
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行板如歌

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kardinalxing: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 确实如此 2012-04-21 10:58:41
leecius: 金币+1, 谢谢,欢迎交流! 2012-04-21 14:14:18
一个挨一个……就算是反相也不好分的。点挨的近说明极性相似,再用极性吸附原理的填料分仍然是不好分开的,不论是正向还是反相。试试用分子筛啊,离子交换啊等等其他的什么的填料吧。真的想用反向的话,最好调整好洗脱剂极性,让点在柱子上走得慢一些,选细长一些的柱子,多冲几个柱体积,这样柱效会高一些,原本分不开的点也能一点点拉开。
2楼2012-04-21 09:44:07
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kaola0916

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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leecius: 金币+1, 谢谢参与! 2012-04-21 14:14:29
kardinalxing: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 很好的建议 2012-04-22 00:36:23
正向上点挨得近,到反相上不一定也挨得近!反相的原理并不只是吸附,普遍认为的是疏溶剂作用。纠正一下。
10:1下来的,极性还可以。建议先用反相的硅胶板摸个条件,看一下成点性,就能知道到底反相合适不合适了。分离极性中等货小的化合物,正反向交替过柱子,效果会很好的。
再或者就是根据正向硅胶板上点的,吸收,荧光,显色情况,大概看看适用分子筛吗。如楼上所说...
3楼2012-04-21 12:52:50
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liupengp02

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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leecius: 金币+1, 谢谢,欢迎交流! 2012-04-21 14:14:35
kardinalxing: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-04-22 00:37:55
反相试试吧。我分的皂苷,在硅胶板上怎么跑都是一个点,用反相跑出来了三个点。
你不懂我,我不怪你
4楼2012-04-21 14:11:56
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袁红娥

银虫 (初入文坛)

为什么对鸭趾草的浸膏进行萃取后,分析发现重叠比较严重啊?这样怎么办呢?
宁静致远……
5楼2012-04-21 16:07:50
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swaucq

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kardinalxing: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 正准备试一试呢 2012-04-23 13:06:14
用小一点的中压RP-18反相柱,如果极性中等,可以用丙酮:水梯度洗脱,但是中压反相也会有些量损失,楼主试过凝胶吗?
不卑不亢
6楼2012-04-23 12:03:40
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追梦人3150

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liupengp02 at 2012-04-21 14:11:56:
反相试试吧。我分的皂苷,在硅胶板上怎么跑都是一个点,用反相跑出来了三个点。

你最后 分开了吗? 我的也是皂苷 不好分
永远有一个梦想
7楼2012-04-23 21:20:01
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liupengp02

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 追梦人3150 at 2012-04-23 21:20:01:
你最后 分开了吗? 我的也是皂苷 不好分

就几瓶分开了
你不懂我,我不怪你
8楼2012-04-23 22:25:00
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追梦人3150

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by liupengp02 at 2012-04-23 22:25:00:
就几瓶分开了

你否 介绍点经验 我正愁呢
永远有一个梦想
9楼2012-04-24 10:36:26
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liupengp02

金虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 追梦人3150 at 2012-04-24 10:36:26:
你否 介绍点经验 我正愁呢

我是西林瓶收集,不点板直接每瓶进液相,相似成分合瓶,之前点薄层都是一个点,做液相才发现每瓶成分都不完全相似。
你不懂我,我不怪你
10楼2012-04-24 20:12:58
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