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kardinalxing

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[求助] 反相分离化合物

以前没用过反相
想请教下用过的虫友就是常压的ODS柱分离什么情况下的化合物效果比较好呢？
现在分离的样品点板时，显示的主斑点有至少4个，而且是一个挨一个的，过常规的硅胶柱很不好分，是不是反相的效果会好一些呢？反相的原理应该也是极性大小吸附的吧，正相不太好分，反相会怎么样呢？
补充下:这些化合物的极性都不算太小，大约是氯仿甲醇比例在10:1条件下冲下来的，反相死吸附应该不是很大影响。
谢谢！

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坚持才有可能会成功！

1楼2012-04-21 00:26:31

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金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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kardinalxing: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢确实如此 2012-04-21 10:58:41
leecius: 金币+1, 谢谢，欢迎交流！ 2012-04-21 14:14:18

一个挨一个……就算是反相也不好分的。点挨的近说明极性相似，再用极性吸附原理的填料分仍然是不好分开的，不论是正向还是反相。试试用分子筛啊，离子交换啊等等其他的什么的填料吧。真的想用反向的话，最好调整好洗脱剂极性，让点在柱子上走得慢一些，选细长一些的柱子，多冲几个柱体积，这样柱效会高一些，原本分不开的点也能一点点拉开。

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2楼2012-04-21 09:44:07

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kaola0916

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kardinalxing: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢很好的建议 2012-04-22 00:36:23

正向上点挨得近，到反相上不一定也挨得近！反相的原理并不只是吸附，普遍认为的是疏溶剂作用。纠正一下。
10:1下来的，极性还可以。建议先用反相的硅胶板摸个条件，看一下成点性，就能知道到底反相合适不合适了。分离极性中等货小的化合物，正反向交替过柱子，效果会很好的。
再或者就是根据正向硅胶板上点的，吸收，荧光，显色情况，大概看看适用分子筛吗。如楼上所说...

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3楼2012-04-21 12:52:50

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