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快乐丝丝

金虫 (小有名气)

[求助] 不同分子量肝素的纯化

大家好,肝素分子量从几千到几万范围很广,怎样筛选出较小范围或者大概单一分子量的呢,透析可以吗?但时间怎么把握呢,也不知道透析速率什么的,怎样确定想要的已经大部分出来了呢

先谢谢大家出谋划策啊
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aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
mwyuer: 金币+2, 感谢回帖交流 2012-04-20 08:08:50
lixiangde: 金币+2, 回答的较为全面,再给你点奖励 2012-04-21 10:29:12
mwyuer: 金币+5, 替楼主奖励金币 2012-04-27 19:02:35
目前貌似没有非常有效而且精确的办法。
你可以选两种筛选分子量不同的透析袋,比如说A,B.
A如果可以筛选分子量大于6K的蛋白,你先用A做透析得到分子量大于6K的蛋白;
B如果可以筛选分子量大于12K的蛋白,你把上面筛选过的蛋白放到B里面透析,你需要保留透析袋外面的液体,然后收缩体积,冻干。你得到的蛋白分子量应该介于6K和12K之间。
关于透析时间,一般来说取决于你的蛋白浓度和透析袋的体积。
一般认为透析浓度为5%,分子量为5K的蛋白溶液,一开始只加入透析袋体积的一半,定时间换水,等透析袋里面液体完全充满透析袋的时候,透析一般就结束了。
SDS-PAGE也许能帮你验证分子量的筛选结果。
格物致知,知行合一
2楼2012-04-20 03:16:34
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aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

我需要金币,金币
格物致知,知行合一
3楼2012-04-20 15:49:36
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快乐丝丝

金虫 (小有名气)

markar: , 嗯,版主可以代扣金币的! 2012-04-21 17:23:30
引用回帖:
3楼: Originally posted by aircraftvip at 2012-04-20 15:49:36:
我需要金币,金币

我给你评分时送金币  结构显示你这不是应助贴 所以送不了金币,无奈我就花了5个金币给你送红花了 哈哈
4楼2012-04-21 09:27:15
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