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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xintutiao

金虫 (小有名气)

[求助] 小女子求助各位大侠

各位大侠 请帮帮小女子 如何从环境样品(污泥 土壤 沉积物)中如何提取总蛋白质 提出蛋白质如果想用hplc检测的话 需要做哪些上样前的预处理。小女子没有做蛋白的任何背景 实验室以前也没有做过 请各位大侠帮帮忙 小女子不胜感激
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迷情八月

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人感觉,土壤中的蛋白质含量非常低,所以你要保证你的取样量要大,这个不好估计,你可以参考下文献,土壤中蛋白的含量比例。然后常规的溶解,离心,杂质去除之后,再用常规的蛋白提取方法,硫酸铵沉淀,透析,冻干。
7楼2012-04-24 11:44:19
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xintutiao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by foxmygod at 2012-04-22 02:22:26:

希望前辈多多指点 不要只嘲笑我嘛
3楼2012-04-23 17:56:06
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先离心、过滤,充分去除非溶解性的物质,取上清液,然后盐析去沉淀。而后根据需要进行分离提纯。
4楼2012-04-24 00:21:56
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

过滤后取上清液,还可以超滤、减压蒸馏获得游离蛋白质。如果你要取得污泥里的生物的蛋白质,那么首先要提纯出微小的生物,比如细菌,原生动物,病毒等,要用不同的过滤装置收集,然后对不同的微生物加以粉碎后收集蛋白质,并去掉其他生物大分子。
5楼2012-04-24 00:29:16
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