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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS聚丙烯酰胺蛋白电泳 上样时蛋白样品从孔中飘出
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mungbean3881

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我们一般用吹管吹梳子孔里的游离胶，吹不吹的干净应该可以看到，吹不干净的话，再吹的时候可以看到液体胶与水融合的那种现象
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吃亏未必是祸，占便宜一定不是福
11楼2012-04-18 20:16:14
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baier_1989

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by susizheng at 2012-04-18 16:14:28:
这情况还真没出现过，再确定下是否加甘油了？
另外是否是开始电泳了才往出漂，如果是，检查下是否是电极接反了。

上样时就飘了 还没通电呢
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12楼2012-04-18 23:28:03
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308630949

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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楼主可以试试把样品缓冲液和电泳缓冲液都重新配下，样品的问题不大，即使有问题也可以跑出条带，以前我也是出现过这个问题，后来重新配了下就没事了
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13楼2012-04-19 09:03:14
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
baier_1989: 回帖置顶 2012-06-04 19:09:11
胶孔没洗干净，我前两次也出现过这种现象，就是因为胶孔里面有碎胶，解决办法：插梳子、拔梳子时候要干脆利索，这样产生的碎胶少，洗胶孔时候用稍大一些的（如20ml容量）注射器洗涤，尽量使对胶孔的冲击力大一些，把碎胶都冲出来，再上样就好多了。
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14楼2012-04-19 09:31:50
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得，你这是把正负极接反了，不然不可能说跑出来，一点条带都没有的
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15楼2012-04-19 10:24:53
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nmgdwg

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的样品里有大量的硫酸铵？
硫酸铵沉淀完的样品直接制样，发生过往上跑和跑成柱状的现象，但也没有全都跑到孔外边啊！你加了什么神奇的东西，不行试试倒着跑，哈哈
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16楼2012-04-19 14:22:03
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shanshan33

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上样孔有没有气泡。多加点loading buffer
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17楼2012-04-19 15:10:16
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
点样孔里有胶或者有气泡
上样缓冲液有问题吧
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快乐奋斗，创造所有。
18楼2012-04-19 16:53:49
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东方龙飞

铜虫 (正式写手)
baier_1989: 回帖置顶 2012-06-04 19:09:17
分析下来，三个原因：
1、 你的样品孔做浓缩胶的时候有问题，所以导致样品进不去，一点样就漂，或者根本就压不下去。
2、 你的样品处理的有问题，也就是说loading buffer稀释倍数太多了，所以样品会漂。
3、 你的样品有问题，蛋白不够。因为即使是水+loading buffer，也还是会沉到底的。
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19楼2012-04-19 16:56:53
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yanhua_2006

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是装胶的时候正负极接反了？每次都出这个问题的话可能就是缓冲液或者体系有问题，再重新更换缓冲液试试吧
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20楼2012-04-20 09:52:36
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