24小时热门版块排行榜    

查看: 5498  |  回复: 29
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

baier_1989

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS聚丙烯酰胺蛋白电泳 上样时蛋白样品从孔中飘出

我做的是肝脏提取的线粒体蛋白,和2X loading buffer混合煮沸,一上到孔中样品,就开始从孔里呈线状向上飘,一会就全浮到缓冲液里了,电泳后什么也跑不出来。奇怪的是我用的低标蛋白marker也飘出来了,(marker我也和2X loading buffer混合了,但没有煮沸)以前做过,没出现这情况。以前做的时候2X loading buffer是别人配好的的,这次是我新配的,蛋白样品是1月提取的,跑过一次胶后,就一直-70存着。
       是2X loading buffer的问题,还是蛋白已经降解了?有几个样品没有飘出,但是跑出来整个道都是,一个柱状,没有条带。胶应该没问题。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanhua_2006

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是装胶的时候正负极接反了?每次都出这个问题的话可能就是缓冲液或者体系有问题,再重新更换缓冲液试试吧
20楼2012-04-20 09:52:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 baier_1989 的主题更新
信息提示
请填处理意见