8楼: Originally posted by lxmouse84 at 2012-04-17 14:10:35:
看了这么多回复，感觉都没说全啊。pET28a上面两个His tag，第一个当然是表达N端带his用的，第二个是用来表达C端带his用的。你想表达C端带his的，怎么能扯到rbs序列那里。要是N端不想要多余的东西，直接用上游NcoI ...

11楼: Originally posted by castlered at 2012-04-18 08:45:46:
扯到rbs是因为我的序列里有NcoI这个酶切位点，纠结了下能不能用XbaI，然后脑子短路了下。。。去掉终止密码子这些我是知道的。
目前讨论的结果应该是rbs是需要的，也就是说如果我的片段里有NcoI酶切位点的话，就 ...

11楼: Originally posted by castlered at 2012-04-18 08:45:46:
扯到rbs是因为我的序列里有NcoI这个酶切位点，纠结了下能不能用XbaI，然后脑子短路了下。。。去掉终止密码子这些我是知道的。
目前讨论的结果应该是rbs是需要的，也就是说如果我的片段里有NcoI酶切位点的话，就 ...