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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)

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[求助] TA克隆为什么总是假阳性啊？已有1人参与

我这一阵在做TA克隆，切胶回收的片段条带很清晰，但是每次连接都是假阳性或者是连不上，这是什么原因呢，求助啊！

切胶回收后的条带

第二个孔为目的条带，后面为菌落PCR结果，求解

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1楼 2012-04-16 16:20:18

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steler_ly

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

16°连接过夜，多挑克隆做菌落PCR..

30楼2012-04-19 09:20:22

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zhang8826857

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 欢迎斑斑常来啊~ 2012-04-16 21:22:42
kabuqinuo89: 金币+1 2012-04-17 17:14:11

你有没有做一步加A的操作呀？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

好孩子！

2楼2012-04-16 18:18:52

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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by zhang8826857 at 2012-04-16 18:18:52:
你有没有做一步加A的操作呀？

我是用的Taq酶，应该不用再加A吧，不过我打算明天再加一下A试试

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3楼2012-04-16 21:30:43

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zhang8826857

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【答案】应助回帖

引用回帖:

3楼: Originally posted by kabuqinuo89 at 2012-04-16 21:30:43:
我是用的Taq酶，应该不用再加A吧，不过我打算明天再加一下A试试

哦，用的taq酶呀，那就不用加A啦。可能是连接的时间不够？而且连接的温度不能高于25度，你用的是什么T载体？takara的吗？

赞一下(1人)

好孩子！

4楼2012-04-16 22:57:26

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