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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 请教无菌检查法中直接接种法
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li205060

银虫 (小有名气)

[求助] 请教无菌检查法中直接接种法

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请教做无菌的老师：非水溶性制剂做直接接种法时，先加PH7氯化钠-蛋白胨缓冲液稀释后，加青霉素酶灭活，最后接种到培养基管中后显浑浊怎么办？是不是供试品浓度太高？可以增加稀释液的用量吗？稀释到何种浓度比较适宜？有没有可参考的相关规定？
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1楼 2012-04-11 15:32:54
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mouse103: 金币+1, 谢谢参与 2012-04-11 17:19:54
li205060: 金币+5, ★有帮助, 感谢帮助 2012-04-12 15:51:31
注入的供试液体积有限制，如果增加稀释液的用量，注入的体积是否会超标？用薄膜过滤法，可以避免出现浑浊，或许可以试试这种方法。
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li205060
守候在风中的宁静。
2楼2012-04-11 16:13:38
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li205060

银虫 (小有名气)
因制剂原因，没有适宜溶剂使其完全溶解，不能采用薄膜过滤法。如果过量稀释样品，那么接种的供试溶液是否就不具代表性了呢？不知道这个是否有个限度。
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3楼2012-04-11 16:34:31
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li205060

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-04-11 16:13:38:
注入的供试液体积有限制，如果增加稀释液的用量，注入的体积是否会超标？用薄膜过滤法，可以避免出现浑浊，或许可以试试这种方法。

请教版主，注入体积超标是个啥意思？
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4楼2012-04-11 16:41:21
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

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引用回帖:
4楼: Originally posted by li205060 at 2012-04-11 16:41:21:
请教版主，注入体积超标是个啥意思？

直接接种法，不是加入供试品的么..
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守候在风中的宁静。
5楼2012-04-11 16:45:46
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li205060

银虫 (小有名气)
供试品按药典附录无菌检查法要求需用稀释液进行稀释，因制剂为非水溶性制剂
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6楼2012-04-11 17:30:23
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taoyuanjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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li205060: 金币+5, ★有帮助, 观察长菌现象 2012-04-12 15:49:55
浑浊是晃动状态吗？看下静止后是否还有浑浊，如果上层也不浑浊，长菌后也能够观察到。
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7楼2012-04-12 09:55:10
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

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引用回帖:
7楼: Originally posted by taoyuanjing at 2012-04-12 09:55:10:
浑浊是晃动状态吗？看下静止后是否还有浑浊，如果上层也不浑浊，长菌后也能够观察到。

出现浑浊是不行的吧，即使只是下层。白色念珠菌是沉底的。
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守候在风中的宁静。
8楼2012-04-12 10:14:48
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taoyuanjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-04-12 10:14:48:
出现浑浊是不行的吧，即使只是下层。白色念珠菌是沉底的。

你说的假设出现白色念珠菌，它是真菌有可能沉淀在底部，此时可以晃动一下，如果本身药品浑浊的不厉害，长菌和没长菌的是可以分开来的，如果药品浑浊很厉害区分不出来，可以单独取怀疑长菌的液体接种，就知道结果了。
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9楼2012-04-12 10:41:22
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

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引用回帖:
9楼: Originally posted by taoyuanjing at 2012-04-12 10:41:22:
你说的假设出现白色念珠菌，它是真菌有可能沉淀在底部，此时可以晃动一下，如果本身药品浑浊的不厉害，长菌和没长菌的是可以分开来的，如果药品浑浊很厉害区分不出来，可以单独取怀疑长菌的液体接种，就知道结果 ...

白色念珠菌，验证的时候必须出现的。而且它相比改良马丁培养基较重，必然沉底（铺一层）。药品浑浊，很难分辨，容易造成假阳性。

还是觉得薄膜过滤法比较可行。
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10楼2012-04-12 10:46:20
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