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香香and贝贝

新虫 (初入文坛)

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[求助] 免疫荧光三标

请教大家FITC、cy3、cy5可以作为免疫荧光三标吗？我想选它们作为二抗荧光标记，不知道用共聚焦观察时，三者会不会影响啊？

[ Last edited by 香香and贝贝 on 2012-4-9 at 10:33 ]

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1楼 2012-04-09 10:18:57

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shenjijia

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
tuobaohua: 金币+3, 积极应助，欢迎常来科研版！ 2012-04-09 19:48:05

FITC分子量为389.4，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长，激发光波长为360nm，发射光波长为450nm。
Cy3最大激发光波长为570nm，最大发射光波长为650nm，呈绿色荧光。但是在绿光光谱波长激发下，Cy3也可出现红色荧光。
Cy5最大激发光波长为649nm，最大发射光波长为680nm，呈红色荧光。
关键是不同分子要求显示不同颜色，这样才能区别不同的目的分子。可以征求激光共聚焦显微镜操作老师的意见

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2楼2012-04-09 17:47:17

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