应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 做过跨膜蛋白原核表达的战友过来看看哦
21/1返回列表
查看: 4447  |  回复: 18
查看全部回帖@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

幸福常在

铁虫 (初入文坛)

[求助] 做过跨膜蛋白原核表达的战友过来看看哦已有1人参与

我的跨膜蛋白，具七次跨膜结构，用过PET28a载体分别转过BL21（DE3）和具有稀有密码子的transset（DE3)宿主,同时做过两遍的时间诱导（2h，4h，6h）和浓度诱导（0.2,0.6,1.0,1.4的IPTG），同时做是其他基因完美诱导出来了，就是这个具有跨膜结构的一直SDS-PAGE无条带，现在转换PET32a载体转BL21（de3），但是一直连接不上，目前原核表达已经耗时近2个月共8次了，甚为纠结，含泪求各位战友指教！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2012-04-09 09:45:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莲绽夜阑

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by beimi at 2013-01-18 07:19:40
我也是做这个的，跨莫蛋白，我是做翻译后修饰，你的iptg浓度太高了，我最多才用0.05，用哦
0。01也行，低温，段时间，我做了三个月了，快昨晚了，祝好听

我刚开始做蛋白表达，也是膜蛋白，我做膜蛋白胞外部分原核表达，蛋白比较大，70KD,想问问你表达的蛋白多大？用的什么载体和细胞？像我这种情况能不能可能表达出可溶蛋白？
新手，求指教！
赞一下 回复此楼
对于一切一切的黑暗，至少不要绝望
9楼2013-04-17 09:49:00
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 幸福常在 的主题更新
21/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭