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whgatcq

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于MTT法测淋巴细胞转化率,很多图搞不懂! 谢谢!

我做的是MTT法测淋巴细胞转化率,实验室没人做过,很多图片都搞不懂。
血是从小鼠眼静脉用毛细管采的,所以采血的时候没有做到无菌操作,淋巴细胞分层液分的淋巴细胞,96孔板培养,加了双抗但是还是有些应该污染了,最后的OD值很乱,有的大到0.5,但大部分连0.1都不到,为什么呢?

有比较熟悉的跟我说道说道吧。 太郁闷了~~  无比感谢啊!

下面的图都是400的~

这个是培养的淋巴细胞,但是有很多小点点,不知道是什么,是污染还是其他的呢?这大概是培养了15个h的图片。



这个孔里底色就比较干净,没有那些点点。什么原因呢,操作都差不多的。



MTT染色后应该是这个样子吗? 我看很多都是雪花状,但是结晶不应该是在细胞内吗?怎么会那么大呢? 还是因为污染带入的其他微生物的染色呢?



另外这孔就没有上面的大雪花,实在不知道应该是什么样的。
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liuxiu841027

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

第一张图片应该是污染了吧,我的也是这样了,倒数第二张可能是细胞死了,污染后形成的絮状物。另外,我发现我的药物浓度高了后也会结晶析出,形成大的晶体,是在培养基中,不是在细胞内,形成结晶后,对细胞毒性反而小了。
2楼2012-10-22 17:26:29
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