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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 植物脱毒的问题
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欢仔

银虫 (正式写手)

[求助] 植物脱毒的问题

我在做叶片的愈伤组织，最近用了嫩叶做，做了两三批，叶子都是消毒过度的样子，昨天我用75醇消毒10秒 泡腾水30秒 结果还是消毒过度，植物的嫩叶该怎么脱毒啊
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勇于尝试新鲜事物
1楼2012-04-07 14:11:10
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曾经遥远

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
SongQ5285: 金币+2, 鼓励提供帮助 2012-04-07 17:30:05
欢仔: 金币+5, ★★★很有帮助, 2 2012-04-08 00:39:03
泡腾水是什么？  我个人觉得嫩叶做的话，75%酒精灭菌30s就差不多了，或者0.1%升汞1~2min，太久会杀死细胞的。以前做过甘蔗生长中心消毒，我们直接就是用75%酒精擦拭每一层表面叶子，知道最后白白的嫩叶就不用擦拭了，直接可以培养。污染率很低。
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选择了就不要放弃
2楼2012-04-07 15:20:20
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曾经遥远

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
SongQ5285: 金币+1, 鼓励应助 2012-04-07 17:30:17
另外，酒精和升汞都是强的灭菌剂，如果实在不行就换次氯酸钠吧 ，这个相对弱一点。
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选择了就不要放弃
3楼2012-04-07 15:26:28
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huang1030

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主做的是什么植物啊，我也做组织培养的，一般是获得无菌苗后，直接用无菌苗的叶子哦，就不用消毒了，叶子的消毒确实不好控制。
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4楼2012-04-07 20:28:46
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 曾经遥远 at 2012-04-07 15:20:20:
泡腾水是什么？  我个人觉得嫩叶做的话，75%酒精灭菌30s就差不多了，或者0.1%升汞1~2min，太久会杀死细胞的。以前做过甘蔗生长中心消毒，我们直接就是用75%酒精擦拭每一层表面叶子，知道最后白白的嫩叶就不用擦拭 ...

呵呵 就是次氯酸纳片吧  具体成分还有什么我还不清楚  我前一阵脱毒做的没问题 就是最近 用的叶片是嫩叶 就很麻烦了  做了几十瓶 全都黄了  不知道是为什么
用75醇擦叶片就可以吗
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勇于尝试新鲜事物
5楼2012-04-08 00:24:53
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by huang1030 at 2012-04-07 20:28:46:
楼主做的是什么植物啊，我也做组织培养的，一般是获得无菌苗后，直接用无菌苗的叶子哦，就不用消毒了，叶子的消毒确实不好控制。

是啊  特别是嫩叶
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勇于尝试新鲜事物
6楼2012-04-08 00:26:28
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 曾经遥远 at 2012-04-07 15:26:28:
另外，酒精和升汞都是强的灭菌剂，如果实在不行就换次氯酸钠吧 ，这个相对弱一点。

升汞是怎么配的 我没用过 效果好吗
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勇于尝试新鲜事物
7楼2012-04-08 19:51:32
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瘟疫天使

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
升汞实验室可以直接要现成的。酒精就像前戏，擦擦就好。重点是扔升汞里泡泡。在你手头一堆材料的时候，你不会每个都看看时间的，更别说在超净台你整个人都埋在里面。多做几组你会对大概材料和消毒时间的经验。虽说你在做科学试验，可是连讲授和手册上都会有比如材料较幼嫩适量减少升汞消毒时间。什么叫较，适量？这说明你的经验，操作对试验影响还是很大的。

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8楼2012-04-10 12:38:53
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瘟疫天使

银虫 (小有名气)
材料嫩也得扔进去泡，死不了那么快

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9楼2012-04-10 12:41:17
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欢仔

银虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 瘟疫天使 at 2012-04-10 12:41:17:
材料嫩也得扔进去泡，死不了那么快

嗯 我扔进去泡下就拿出来  结果就不行了  所以我想是不是消毒以外的原因  还在尝试
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勇于尝试新鲜事物
10楼2012-04-10 23:19:02
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