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双抗夹心胶体金法的问题
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| 最近在用夹心法做试纸条，用纯化了稻纵卷叶螟的Vg蛋白，给外面的公司分别做出了鼠单抗和兔多抗。做试纸条时，我标记的是单抗，T线划的是多抗，直接用纯化的Vg蛋白做抗原来检测，可是现在我做的是：用水做稀释液是，阴性和阳性(500ng/ml)都显色。用 PH7.4的PBS稀释，阴性和阳性都不显色。而且抗原做梯度稀释（PBS）时，用高浓度的抗原检测时，金标都跑不上面，沉积在金标垫与NC膜之间（阳性稀释到5ng/ml也不显色）。改了很多条件，都没什么改变，不知有没有高手知道，可能的问题是什么呢？（夹心ELISA没什么问题） |
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