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mooze

金虫 (正式写手)

[求助] 求助高手,镜检(革兰氏染色),阳性肠球菌总是出现假阴性

本来应该是蓝色,染出来一直是红色。这是怎么回事儿呀
我们用的是试剂盒染的色,重复了好几次,都是这样。别人的菌用试剂盒染的好好的。

[ Last edited by mooze on 2012-4-6 at 15:22 ]
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chenglong_li

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
amisking: 金币+2, 鼓励帮助解答问题! 2012-04-06 18:23:16
革兰氏染色法,能够把细菌分为两大类:采用这种染色方法,是先用龙胆紫(亦称结晶紫)来染细菌,所有细菌都染成了紫色,然后再涂以革兰氏碘液,来加强染料与菌体的结合,再用95%的酒精来脱色20~30秒钟,有些细菌不被脱色,仍保留紫色,有些细菌被脱色变成无色,最后再用番红或沙黄复染1分钟,结果已被脱色的细菌被染成红色,未脱色的细菌仍然保持紫色,不再着色,这样,凡被染成紫色的细菌称为革兰氏阳性菌(G+菌);染成红色的称为革兰氏阴性菌(G-菌)。
2楼2012-04-06 15:36:44
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chenglong_li

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
mooze: 回帖置顶 2012-04-06 19:41:44
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, Good!说到点子上了! 2012-04-07 00:18:57
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenglong_li at 2012-04-06 15:36:44:
革兰氏染色法,能够把细菌分为两大类:采用这种染色方法,是先用龙胆紫(亦称结晶紫)来染细菌,所有细菌都染成了紫色,然后再涂以革兰氏碘液,来加强染料与菌体的结合,再用95%的酒精来脱色20~30秒钟,有些细菌 ...

关于“革兰氏染色法”
1、染色结果只有两种,是紫色或红色。
2、关键是脱色和设定对照:
①要有革兰氏阳性和阴性对照,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别为典型的阴性和阳性菌,不然无法判断脱色是否合适。
②菌龄要合适,不然老化的革兰氏阳性菌也会被染成阴性。
3、试验注意事项:
①涂片厚薄。
如果片子涂的厚,脱色时间太短,即使是阴性菌也会染成阳性菌。
而片子涂的薄,脱色太久,就反过来,即使是阳性菌也会染成红色,变为阴性菌。
②火焰固定温度。
固定后的标本触及皮肤时,稍感烧烫为度。

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3楼2012-04-06 19:19:54
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mooze

金虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by chenglong_li at 2012-04-06 19:19:54:
关于“革兰氏染色法”
1、染色结果只有两种,是紫色或红色。
2、关键是脱色和设定对照:
①要有革兰氏阳性和阴性对照,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别为典型的阴性和阳性菌,不然无法判断脱色是否合适。
②菌 ...

3Q~
4楼2012-04-06 19:59:57
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zl901203

至尊木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chenglong_li at 2012-04-06 19:19:54
关于“革兰氏染色法”
1、染色结果只有两种,是紫色或红色。
2、关键是脱色和设定对照:
①要有革兰氏阳性和阴性对照,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别为典型的阴性和阳性菌,不然无法判断脱色是否合适。
②菌龄 ...

请问固定时烧哪面呢?是涂菌的那面还是不涂的?要烧几次呢?还有要用盖玻片吗?用的话什么时候盖呢?
工作了,也离不开研究~~沉下心来,积淀自己~
5楼2013-01-05 20:14:48
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