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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助高手，镜检（革兰氏染色），阳性肠球菌总是出现假阴性
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mooze

金虫 (正式写手)

[求助] 求助高手，镜检（革兰氏染色），阳性肠球菌总是出现假阴性

本来应该是蓝色，染出来一直是红色。这是怎么回事儿呀
我们用的是试剂盒染的色，重复了好几次，都是这样。别人的菌用试剂盒染的好好的。

[ Last edited by mooze on 2012-4-6 at 15:22 ]
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1楼 2012-04-06 15:12:16
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chenglong_li

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
amisking: 金币+2, 鼓励帮助解答问题！ 2012-04-06 18:23:16
革兰氏染色法，能够把细菌分为两大类：采用这种染色方法，是先用龙胆紫（亦称结晶紫）来染细菌，所有细菌都染成了紫色，然后再涂以革兰氏碘液，来加强染料与菌体的结合，再用95%的酒精来脱色20～30秒钟，有些细菌不被脱色，仍保留紫色，有些细菌被脱色变成无色，最后再用番红或沙黄复染1分钟，结果已被脱色的细菌被染成红色，未脱色的细菌仍然保持紫色，不再着色，这样，凡被染成紫色的细菌称为革兰氏阳性菌（G+菌）；染成红色的称为革兰氏阴性菌（G-菌）。
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2楼2012-04-06 15:36:44
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chenglong_li

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
mooze: 回帖置顶 2012-04-06 19:41:44
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, Good！说到点子上了！ 2012-04-07 00:18:57
引用回帖:
2楼: Originally posted by chenglong_li at 2012-04-06 15:36:44:
革兰氏染色法，能够把细菌分为两大类：采用这种染色方法，是先用龙胆紫（亦称结晶紫）来染细菌，所有细菌都染成了紫色，然后再涂以革兰氏碘液，来加强染料与菌体的结合，再用95%的酒精来脱色20～30秒钟，有些细菌 ...

关于“革兰氏染色法”
1、染色结果只有两种，是紫色或红色。
2、关键是脱色和设定对照：
①要有革兰氏阳性和阴性对照，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别为典型的阴性和阳性菌，不然无法判断脱色是否合适。
②菌龄要合适，不然老化的革兰氏阳性菌也会被染成阴性。
3、试验注意事项：
①涂片厚薄。
如果片子涂的厚，脱色时间太短，即使是阴性菌也会染成阳性菌。
而片子涂的薄，脱色太久，就反过来，即使是阳性菌也会染成红色，变为阴性菌。
②火焰固定温度。
固定后的标本触及皮肤时，稍感烧烫为度。
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mooze
3楼2012-04-06 19:19:54
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mooze

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by chenglong_li at 2012-04-06 19:19:54:
关于“革兰氏染色法”
1、染色结果只有两种，是紫色或红色。
2、关键是脱色和设定对照：
①要有革兰氏阳性和阴性对照，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别为典型的阴性和阳性菌，不然无法判断脱色是否合适。
②菌 ...

3Q~
4楼2012-04-06 19:59:57
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zl901203

至尊木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chenglong_li at 2012-04-06 19:19:54
关于“革兰氏染色法”
1、染色结果只有两种，是紫色或红色。
2、关键是脱色和设定对照：
①要有革兰氏阳性和阴性对照，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别为典型的阴性和阳性菌，不然无法判断脱色是否合适。
②菌龄 ...

请问固定时烧哪面呢？是涂菌的那面还是不涂的？要烧几次呢？还有要用盖玻片吗？用的话什么时候盖呢？
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工作了，也离不开研究~~沉下心来，积淀自己~
5楼2013-01-05 20:14:48
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