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yangzhengnan

新虫 (初入文坛)

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虫号: 909093
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[求助] 荧光pcr标准曲线问题

今天做了一条标准曲线，很奇怪，目的基因模板按2倍稀释，但是ct值却相差很小，复孔之间的差别很大，但内参复孔间的差别很小，不知各位大侠可不可以给点建议呢？到底是哪里出了问题？

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1楼 2012-04-05 17:33:51

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小慈abc

铜虫 (小有名气)

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虫号: 1908809
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专业: 环境卫生

引用回帖:

14楼: Originally posted by beautybanana at 2014-06-26 21:16:23
浓度不能太高, 否则扩增的曲线会有些异常, PCR体系中最高的浓度你可以用0.5 ng/ul, 后面0.05ng/ul, 10倍稀释的...你先试试, 有问题再继续问我好了....

还有一个关于您说的稀释液的问题我试过用水稀释和稀释液稀释两个相同浓度梯度的ct值差很多稀释液的ct值要大一些这是为什么呢？