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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 不同PH下荧光能量共振转移发生的情况比较，只有一个点没发生FRET，原因是什么？
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俊灵

铜虫 (小有名气)

[求助] 不同PH下荧光能量共振转移发生的情况比较，只有一个点没发生FRET，原因是什么？

       我最近在做一个实验，用一种生物材料D检测多巴胺，生物材料D的发射光谱与多巴胺的吸收光谱部分重合，但D与抗坏血酸AA的吸收光谱也有部分重合，抗坏血酸是检测多巴胺最常见的干扰物，我想消除抗坏血酸的干扰，原来想法是利用增大PH值，增加生物材料D与AA的距离，这样荧光共振能量转移就不会发生，做的图如下。

       原来以为随着PH增加，生物材料D和AA间的距离越大，那么达到某一个点后，后面就都是平台，但检测结果显然不是这样，达到PH8.9时，然后又反弹了，又出现一定的荧光共振能量转移。为什么只在PH8.9的时候不会有荧光共振能量转移？大家认为是什么原因呢？

     抗坏血酸的PKa值是4.17和11.6，多巴胺的PKa指是9.17。

生物材料D在加入抗坏血酸AA后，D的荧光强度变化值随PH的变化。
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1楼 2012-04-01 15:15:20
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markar

版主 (知名作家)

光之电首席技术官

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-10 08:00:56
会不会是偶然误差
或者pH值本身会影响AA的荧光强度，建议做一个空白参照，即只有AA，同时改变其pH值观察pH值对AA荧光强度的影响，逐步排除干扰因素！
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宠辱不惊，闲看庭前花开花落；去留无意，漫随天外云卷云舒！
3楼2012-04-09 22:29:33
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俊灵

铜虫 (小有名气)
顶一个，这个我问题困扰我很久了，希望大家一起讨论！
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2楼2012-04-09 20:44:18
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