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不同PH下荧光能量共振转移发生的情况比较，只有一个点没发生FRET，原因是什么？
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我最近在做一个实验，用一种生物材料D检测多巴胺，生物材料D的发射光谱与多巴胺的吸收光谱部分重合，但D与抗坏血酸AA的吸收光谱也有部分重合，抗坏血酸是检测多巴胺最常见的干扰物，我想消除抗坏血酸的干扰，原来想法是利用增大PH值，增加生物材料D与AA的距离，这样荧光共振能量转移就不会发生，做的图如下。 原来以为随着PH增加，生物材料D和AA间的距离越大，那么达到某一个点后，后面就都是平台，但检测结果显然不是这样，达到PH8.9时，然后又反弹了，又出现一定的荧光共振能量转移。为什么只在PH8.9的时候不会有荧光共振能量转移？大家认为是什么原因呢？ 抗坏血酸的PKa值是4.17和11.6，多巴胺的PKa指是9.17。  生物材料D在加入抗坏血酸AA后，D的荧光强度变化值随PH的变化。 |
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markar
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