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卷卷兔

新虫 (初入文坛)

[求助] 急!急!急!求教~!我的柱子怎么冲不下来东西

各位虫友们。现在我在跑的是水相,先过了根大孔树脂柱,用水把糖都冲出来了,后面又用10%乙醇和50%乙醇冲洗。现在分为三个部分—纯水部(非糖)、10%乙醇、50%乙醇。最近我在跑纯水部分(非糖),用的是硅胶柱,流动相从10:1氯仿甲醇冲到3:1氯仿甲醇。但是几乎冲不下来东西。我现在怎么办啊?已经过了三个星期了。大家救救我吧!!!
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leonard187

木虫 (著名写手)

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leecius: 金币+1, 谢谢,欢迎交流! 2012-03-30 15:38:58
那么大极性的东西,用硅胶分难度太大了,难免死吸附。分离皂苷的话还得加点水,不能单纯有机相。水层的应该更不好分。试试含水系统吧。另外加水不是把硅胶洗下来,而是大量水会使硅胶失活,变成分配色谱。
燃烧的冰
13楼2012-03-30 14:53:22
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普通回帖

wyys7140

金虫 (小有名气)

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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-03-29 21:36:04
水里应该是没有东西吧,应该是在醇里,跑个板试试里边有没有东西先
2楼2012-03-29 18:29:54
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
3楼2012-03-29 18:42:11
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卷卷兔

新虫 (初入文坛)

我还是和硅胶拌样一起上的
4楼2012-03-29 19:24:07
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win113

金虫 (初入文坛)

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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-03-29 21:36:30
首先你冲出的部分是溶于水的,极性比较偏大,氯仿甲醇3:1的极性不是很大,你试试把甲醇加大比例看看,不用太担心了,只要不是那种吸附在硅胶上不下来的物质都能被冲出来,但是要尽快冲,时间越长吸附越大!
5楼2012-03-29 19:41:13
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rockfeller

木虫 (职业作家)

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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-03-29 21:36:36
同意楼上,估计你跑的那个极性比较大,应当提高甲醇比例
6楼2012-03-29 21:02:19
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

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中药2000: 金币+1, 谢谢参与。 2012-03-31 22:16:20
水下来的东西一般是不做的,应为其在液相上也几乎没有保留,你有特殊目的吗?
分离、分离
7楼2012-03-29 21:37:17
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957618126

铜虫 (小有名气)

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karl2100: 金币+1, 3Q 2012-03-29 22:23:34
纯水部分极性很大,你用氯仿甲醇很难冲下来的,硅胶上面会吸附掉很多样品。洗脱剂里面要加水,甲醇比例也还要调大
笑着走下去
8楼2012-03-29 21:41:04
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卷卷兔

新虫 (初入文坛)

没有特殊的目的,我是第一次做,开始用10:1氯仿甲醇跑了板,rf在0·2,就上了样,结果就这样了。
9楼2012-03-30 10:48:34
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卷卷兔

新虫 (初入文坛)


中药2000: 金币+1, 谢谢参与。 2012-03-31 22:16:31
加水的话,不是会把硅胶融下来吗?
10楼2012-03-30 10:49:38
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