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hanzhinan

木虫 (正式写手)

[求助] 麦角甾醇含量的测定

实验测定的吸光度是在0.2-0.8之间,但是得出的数据结果为负值。求助有做过相关实验的虫友给予解答.
紫外测定:用紫外分光光度计在240 ~300 nm的波长范围内测定。在240 ~300 nm的波长范围内有四个吸收峰,麦角甾醇和24(28)DHE在281.5nm处都有吸收峰,但是在230nm处只有24(28)DHE有吸收峰,麦角甾醇的百分比含量可以通过总的麦角甾醇和24(28)DHE(通过计算281.5nm处的吸收)减去230nm处的24(28)DHE吸收。
麦角甾醇的含量通过以下公式进行计算:
麦角甾醇%+24(28)DHE % = [(A281.5/290) × F]/湿菌重;
24(28)DHE % =[(A230/518)× F]/湿菌重;
麦角甾醇% =[麦角甾醇%+24(28)DHE %]- 24(28)DHE %,
其中F是稀释倍数, 290 和 518 是 E 值 (每厘米的百分比)分别由麦角甾醇和24(28)DHE的晶体结构决定。实验重复三次。
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