24小时热门版块排行榜    

查看: 4384  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hdfish860907

铁虫 (初入文坛)

[求助] 两个基因融合构建真核表达载体需要去掉信号肽吗?

用的是真核表达载体PCDNA3.1(+),不太明白是要两个基因的信号肽都去掉还是去掉其中的一个?只知道该载体上面没有信号肽,请说的具体些
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢铮

至尊木虫 (著名写手)

爱分子爱实验

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hdfish860907: 金币+1, 有帮助 2012-03-30 18:04:36
信号肽可以报成你合成的成熟蛋白被运送到细胞以外,是分泌蛋白必须的。但是如果你只是为了得到该蛋白,可以切掉信号肽序列,这样直接可从细胞内提取出来。
看了你的用途,认为应该保留信号肽。
博学好友张弛有度
7楼2012-03-29 20:35:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

glucidum

金虫 (正式写手)

这个是哺乳细胞表达载体,我不太了解。
通常在真菌中表达时,一般会去掉原来的信号肽,主要是担心原来的信号肽会干扰蛋白外分泌。
我想,你需要告诉大家你是想要得到融合蛋白,还是想让融合蛋白在细胞内表达,研究相关生物学功能。
希望有了解哺乳细胞表达的虫子可以解答你的问题。
2楼2012-03-27 08:33:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

超然渡陈

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要不要信号肽是要看你研究蛋白的什么功能。要是做蛋白定位的话肯定是需要信号肽了。只是想得到融合蛋白的话就去掉信号肽只表达成熟肽,目的蛋白留在细胞内比分泌到胞外更容易获取。
3楼2012-03-27 09:51:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小周

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要是做外泌的话,一定保留前面一个基因的信号肽,把后面的基因的信号肽去除。
4楼2012-03-27 10:38:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +6 ErMiao1020 2026-03-02 6/300 2026-03-02 18:14 by lature00
[考研] 282求调剂 +4 2103240126 2026-03-02 6/300 2026-03-02 18:07 by 2103240126
[考研] 一志愿东北大学化学314分求调剂 +3 lr1212.. 2026-03-02 3/150 2026-03-02 17:36 by yeahyou
[考研] 求调剂 +9 yunziaaaaa 2026-03-01 10/500 2026-03-02 15:18 by 半截的诗0927
[考博] 诚招农业博士 +3 心欣向荣 2026-02-28 3/150 2026-03-02 13:33 by 时间不狗
[考研] 276求调剂 +4 路lyh123 2026-02-28 5/250 2026-03-02 11:20 by yuchj
[考研] 295求调剂 +8 19171856320 2026-02-28 8/400 2026-03-02 11:19 by yuchj
[考研] 材料学硕318求调剂 +14 February_Feb 2026-03-01 16/800 2026-03-02 11:17 by yuchj
[考研] 0854复试调剂 276 +4 wmm9 2026-03-01 6/300 2026-03-02 09:28 by 热情沙漠
[考研] 322求调剂 +3 熊境喆 2026-03-01 3/150 2026-03-02 08:44 by houyaoxu
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
请填处理意见