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zhejiahuo1

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于DAPI和PI染色问题,大家帮我看看 已有2人参与

我用DAPI:10微克,PI :5微克 避光染色两个小时,结果DAPI的荧光不强烈,而且在观察DAPI荧光的同时还会看到红色荧光,这是怎么回事啊???之前也有人做过相同的实验,但不是不同批次的DAPI 和PI,出来的效果非常好,请问是试剂的问题还是另有其他的问题? 一家帮我解答一下吧,最近做实验好着急啊
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wansanlian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
DAPI和PI染色是分别染什么的啊?
乱花渐欲迷人眼
2楼2012-03-26 09:36:55
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zhejiahuo1

铁虫 (小有名气)

这两种染料染得是同一种物质:孢子虫,用以区分死活
3楼2012-03-28 22:10:42
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guochuan104

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问LZ做出来了吗?我也要用DAPI/PI区别活菌和死菌,但都查不到什么资料,本身又不是学生物的,一头雾水,LZ能分享下成功经验么?
4楼2012-08-06 09:31:27
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
gyfgood: 金币+5, 应助指数+1, 很有帮助! 2012-08-07 21:25:28
1.DAPI染的是双链DNA,PI染的是DNA和RNA。
2.二者颜色不同,DAPI在荧光显微镜看到的是紫蓝的光,PI则显示桔红色的光芒。
楼主用DAPI染色体是红色,个人觉得,你的浓度偏低或者DAPI失效。具体浓度可以查看相关文献再确定。
有关资料可以参见http://bbs.bioon.net/bbs/archiver/?tid-278890.html
5楼2012-08-06 19:05:05
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iris636

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

DAPI可以染活细胞的细胞核,一般显色蓝色。PI只能染细胞膜破裂的细胞核,一般为橘红色。你能看到红色的原因也可能是显微镜这两个镭射光的波段设置交叉部分太多
6楼2014-03-06 12:39:44
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yxwniub

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-06 19:05:05
1.DAPI染的是双链DNA,PI染的是DNA和RNA。
2.二者颜色不同,DAPI在荧光显微镜看到的是紫蓝的光,PI则显示桔红色的光芒。
楼主用DAPI染色体是红色,个人觉得,你的浓度偏低或者DAPI失效。具体浓度可以查看相关文献 ...

您好,您的PBS配方能告我一下吗?因为PBS 有很多种
谢谢
存在即合理
7楼2015-04-06 16:43:31
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chenguestc

木虫 (职业作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yxwniub at 2015-04-06 16:43:31
您好,您的PBS配方能告我一下吗?因为PBS 有很多种
谢谢...

10×PBS:
NaCl                    75.972g
Na2HPO4.12H2O          25.0698g
NaH2PO4.2H2O           4.6803g
定容至1000ml
8楼2015-04-07 12:49:39
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劳资要补钙

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by guochuan104 at 2012-08-06 09:31:27
请问LZ做出来了吗?我也要用DAPI/PI区别活菌和死菌,但都查不到什么资料,本身又不是学生物的,一头雾水,LZ能分享下成功经验么?

我也在做。。。请问你有答案了吗?不知道怎么用DAPI区别活菌死菌
9楼2016-12-27 21:21:54
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Sheryl2017

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by guochuan104 at 2012-08-06 09:31:27
请问LZ做出来了吗?我也要用DAPI/PI区别活菌和死菌,但都查不到什么资料,本身又不是学生物的,一头雾水,LZ能分享下成功经验么?

和你一样,哭死~~~
10楼2018-12-03 09:48:01
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