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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助】农药 如何添加到固体培养基中？
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OAOA_

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】农药 如何添加到固体培养基中？

做农药诱导酵母菌的实验。（原本考虑到农药添加到固体培养基中可能比较麻烦，所以打算液体培养，但考虑到培养后还需要涂到平板看表型，如果平板不含农药的话，不能确定该表型是否是农药依赖的，所以想求教农药添加到固体平板的方法）

现在有如下疑问，
1.因为农药成分复杂，不适宜和培养基其他成分混合一起高温灭菌，可否用抽滤除菌？高温灭菌后的medium冷却到什么程度 再加入农药（除菌后的）合适呢？
2.知道农药有些不易溶于水，可以加DMSO助溶么？这对于固体培养基有影响么？
3.这样配好的medium，怎么检验其质量呢？（从颜色、是否凝固这些方面？）

召唤大牛，求解答求提点~~
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1楼 2012-03-23 13:12:15
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yinyanwell

银虫 (小有名气)
1.我当时是每次做的每次都用完了，没有在冰箱里放置，只要农药不挥发，影响可能就不会很大，你可以是一下
2.农药抑制试验挺好做的，我当时做的时候效果特别明显
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4楼2012-03-24 09:18:44
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yinyanwell

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking: 金币+3, MicEPI+1, 鼓励帮助解答问题！ 2012-03-23 18:13:19
OAOA_: 金币+3 2012-03-24 15:06:43
1.可以采用过滤除菌的方法，在培养基冷却到50摄氏度左右（一般凭经验，在培养基快凝固时）加入农药。
2.如果加入了助溶剂，则相应的在对照里加入助溶剂，同时需做不加任何物质的对照组，以期澄清加入助溶剂的影响。
3.其培养基的质量主要看平板中是否有不溶物，农药是否溶解均匀。
4.我做农药抑菌实验时，没加助溶剂。
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OAOA_
2楼2012-03-23 15:16:51
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OAOA_

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by yinyanwell at 2012-03-23 15:16:51:
1.可以采用过滤除菌的方法，在培养基冷却到50摄氏度左右（一般凭经验，在培养基快凝固时）加入农药。
2.如果加入了助溶剂，则相应的在对照里加入助溶剂，同时需做不加任何物质的对照组，以期澄清加入助溶剂的影响 ...

非常感谢！以前没做过，担心农药加固体培养基会出问题~呵呵 这样放心多了
还有几个问题求解，
1.含农药的固体培养基能放多久？跟普通板一样不？（因为每次配的某个浓度的培养基能倒好多板，做抑菌肯定用不了那么多，想知道剩余的这些板能不能留到做表型时候用？）
2.你当时做的时候，感觉这种板好做么？实验效果如何呢？
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3楼2012-03-23 17:13:23
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OAOA_

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yinyanwell at 2012-03-24 09:18:44:
1.我当时是每次做的每次都用完了，没有在冰箱里放置，只要农药不挥发，影响可能就不会很大，你可以是一下
2.农药抑制试验挺好做的，我当时做的时候效果特别明显

OK~~最后还有两个疑问
1.要测MIC时候 怎么设置浓度梯度合适？（看了些文献 想试试0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 2.0 mg/L 可以么？）
2.接触农药时需要专门防护措施不？手套 口罩啥的？谢谢啦
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5楼2012-03-24 10:39:33
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