24小时热门版块排行榜    

查看: 2601  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

WSW_Alone

木虫 (著名写手)

[求助] 高氏一号分离的菌用16S通用引物扩增不出条带

如题,最近用高氏一号涂布并分离保存菌种,肉眼观察应该都是细菌,进行鉴定的时候(模板直接是扎菌/菌液)用16S通用引物8f,1492r进行直接PCR,但是基本上扩增不出条带,即使扩增出来条带也很淡。
请教一下各位前辈这是什么情况?不胜感激。

PCR产物电泳结果
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

處世樹為模,本固任從枝葉動;立身錢作樣,內方還要外邊圓。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WSW_Alone

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xiaoyong1982 at 2012-03-23 11:01:45:
我也做过直接挑菌和提DNA做PCR,还是提DNA以后效果好很多,所以一般都是提DNA后再PCR,用普通的试剂盒做起来还是比较快的,有些菌在PCR体系里裂解不是很好

你说的这个情况可能是高氏一号培养基里的成分对PCR有 ...

是这样的,我高氏一号里面的菌是液体培养之后,用菌液作为模板进行扩增的。
處世樹為模,本固任從枝葉動;立身錢作樣,內方還要外邊圓。
9楼2012-03-24 17:56:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

feierorange

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
WSW_Alone: 金币+1, 有帮助 2012-05-04 01:13:34
我们实验室做的都可以啊,应该和培养基关系不大吧,是不是PCR过程的问题呢?ps:我们用的引物是27f, 1492r或1525r了
2楼2012-03-22 09:27:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WSW_Alone

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by feierorange at 2012-03-22 09:27:33:
我们实验室做的都可以啊,应该和培养基关系不大吧,是不是PCR过程的问题呢?ps:我们用的引物是27f, 1492r或1525r了

你们预处理是怎样的?ps:引物关系很大吗?
處世樹為模,本固任從枝葉動;立身錢作樣,內方還要外邊圓。
3楼2012-03-22 09:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feierorange

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by WSW_Alone at 2012-03-22 09:29:38:
你们预处理是怎样的?ps:引物关系很大吗?

预处理很简单,就是菌体洗涤一下,也用的菌液,8f我没用过,不太清楚,PCR出问题的原因会比较多了,你是别的培养基都可以,唯独高氏一号不行吗?
4楼2012-03-22 09:39:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:04 by 搏击518
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 316求调剂 +6 梁茜雯 2026-03-19 6/300 2026-03-21 06:32 by Ecowxq666!
[考研] 材料 336 求调剂 +3 An@. 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:39 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 334求调剂 +3 志存高远意在机 2026-03-16 3/150 2026-03-18 08:34 by lm4875102
信息提示
请填处理意见