应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr 带好宽啊!苦恼，求助ing!
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
222/3返回列表上一页123下一页
查看: 3040  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhu_linying

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
7楼: Originally posted by cnb1987 at 2012-03-20 13:15:23:
童鞋，在PCR的时候你一定要下功夫在引物设计上，我刚开始做的时候也是这种情况，以前用别人设计的引物，怎么扩都扩不出来，扩出来也是你这种情况，引物的特异性不好，现在自己做实验了，自己设计引物，连本科生上 ...

咱俩用的引物一样么？我用的是师姐的，是细菌16srDAN通用引物，难道通用引物也可以改么？
赞一下 回复此楼
11楼2012-03-20 19:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

倔强的投手

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看着是非特异性扩增，估计是引物的问题
赞一下 回复此楼
12楼2012-03-20 19:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cnb1987

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
西瓜: 金币+1, 鼓励应助 2012-03-21 17:13:30
我们不做细菌的，你这个非特异扩增好明显，Marker跑的比条带好，证明还是产物的问题，你再好好优化一下条件，我没有用过通用引物，你再问问你师姐关于引物的情况！如果长时间还没扩出来，就换引物吧！
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2012-03-21 08:33:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阳光灰灰

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-21 17:13:39
既然都做了那么多温度梯度，特异性还是不太好，重新设计引物试试吧，胶的浓度也可以大些，我们有时用3%或4%的
赞一下(2人) 回复此楼
14楼2012-03-21 09:11:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunwei57

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-03-21 17:13:55
片断较小,建议用3%的胶,从你的条带亮度显示你可以再增加点模板量或增加循环次数
赞一下 回复此楼
15楼2012-03-21 09:11:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咖啡加点糖

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你看看大浓度的胶，低电压，长时间跑出来是什么样子，还是不行的话我也觉得应该换引物了！祝顺利
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2012-03-21 09:48:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjb3344

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, Good！ 2012-03-21 17:14:14
琼脂糖这种现象很正常
用聚丙烯酰胺试试
赞一下 回复此楼
不论在世界的任何角落·都要感到幸福
17楼2012-03-21 10:47:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zcc3255

版主

熊猫

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
zhu_linying: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-03-22 21:55:16
引用回帖:
7楼: Originally posted by cnb1987 at 2012-03-20 13:15:23:
童鞋，在PCR的时候你一定要下功夫在引物设计上，我刚开始做的时候也是这种情况，以前用别人设计的引物，怎么扩都扩不出来，扩出来也是你这种情况，引物的特异性不好，现在自己做实验了，自己设计引物，连本科生上 ...

好好学习吧，PCR的东西太多了，P出来了怎么都对，P 不好原因太多了，程序设计、引物，体系也是很大的问题，
我们原来一直用上海生工的，实验室的都能P出来，偶就P 不出来，郁闷啊，换了隔壁的TAKARA还不行；怕自己操作问题，让同学帮忙一起P 还不行；后来用了宿舍的一个MIX好了，不过条带浓度很低。还好，我只要P出来割胶回收就好了
赞一下 回复此楼
18楼2012-03-21 18:52:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

real-gold

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
曾经也遇到相同情况，
换酶，改用takara的一款叫什么probest，拼写一定是错了。
赞一下 回复此楼
19楼2012-03-22 19:21:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhu_linying

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
19楼: Originally posted by real-gold at 2012-03-22 19:21:45:
曾经也遇到相同情况，
换酶，改用takara的一款叫什么probest，拼写一定是错了。

是什么酶啊？能给些具体信息么？是高保真酶么？
赞一下 回复此楼
20楼2012-03-22 23:10:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhu_linying 的主题更新
222/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-30 14/700 2026-04-01 16:41 by Ccclqqq
[考研] 找调剂 +5 楚乔乔 2026-04-01 5/250 2026-04-01 16:12 by w虫虫123
[考研] 生物学327，求调剂 +4 书上的梅子 2026-04-01 5/250 2026-04-01 15:11 by 544594351
[考研] 生物与医药考研调剂 +4 铁憨憨123425 2026-03-31 4/200 2026-04-01 14:53 by oooqiao
[考研] 0856材料与化工调剂，339 +10 10213207 2026-03-31 10/500 2026-04-01 08:28 by Linda Hu
[考研] 环境工程297分求调剂一志愿杭高院 +10 GENJIOW 2026-03-31 10/500 2026-04-01 01:30 by 1018329917
[考研] 合肥区域性重点一本招收调剂 +4 6266jl 2026-03-30 8/400 2026-03-31 18:43 by 6266jl
[考研] 299求调剂 +8 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 8/400 2026-03-31 18:23 by lizhi8172
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +9 手机用户 2026-03-26 9/450 2026-03-31 18:09 by 544594351
[考研] 一志愿中海洋材料357 +4 麦恩莉. 2026-03-30 4/200 2026-03-31 14:35 by 记事本2026
[考研] 吉大生物学326分求调剂 +3 sunnyupup 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:28 by longlotian
[考研] 083000环境科学与工程调剂，总分281 +4 橙子（胜意） 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂 +25 稻妻小编 2026-03-26 25/1250 2026-03-30 20:11 by 滴滴上岸呀
[考研] 332求调剂 +6 @MZB382400 2026-03-28 6/300 2026-03-30 16:57 by 无际的草原
[考研] 329求调剂 +8 星野? 2026-03-26 8/400 2026-03-30 13:41 by chemdavid
[考研] 327求调剂 +6 汲亦昊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:40 by peike
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 315调剂 +4 0860求调剂 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:23 by wangjy2002
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭