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zhu_linying

新虫 (初入文坛)

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虫号: 1698733
注册: 2012-03-17
专业: 环境微生物学

[求助] pcr 带好宽啊!苦恼，求助ing!

我从土壤中提取总DNA，用细菌通用引物F338-GC/R518，最近pcr出来的结果有两条离的很近的带，目的条带很宽，温度梯度都做了55-66，都是有两条很近的带，求高手相助，万分感谢！！

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1楼2012-03-20 00:16:58

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zcc3255

木虫 (正式写手)

熊猫

应助: 13 (小学生)
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性别: MM
专业: 观赏园艺学

【答案】应助回帖

★
zhu_linying: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-03-22 21:55:16

引用回帖:

7楼: Originally posted by cnb1987 at 2012-03-20 13:15:23:
童鞋，在PCR的时候你一定要下功夫在引物设计上，我刚开始做的时候也是这种情况，以前用别人设计的引物，怎么扩都扩不出来，扩出来也是你这种情况，引物的特异性不好，现在自己做实验了，自己设计引物，连本科生上 ...

好好学习吧，PCR的东西太多了，P出来了怎么都对，P 不好原因太多了，程序设计、引物，体系也是很大的问题，
我们原来一直用上海生工的，实验室的都能P出来，偶就P 不出来，郁闷啊，换了隔壁的TAKARA还不行；怕自己操作问题，让同学帮忙一起P 还不行；后来用了宿舍的一个MIX好了，不过条带浓度很低。还好，我只要P出来割胶回收就好了