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若然飞翔

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 酶切专家 at 2012-03-21 22:26:15:
我得理解:你只是想把该膜蛋白的胞外区分泌表达到培养基中,而不是表达完整的膜蛋白,对吗?
如果是这样,你可以用pCDNA3.1,没问题,只是表达量可能比较低。
比较经典的瞬时表达系统有两个,这两个瞬时表达系统 ...

完整的膜蛋白是有几个亚基组成的,我想要分泌表达的是其中的一个亚基,也是在膜上,我觉得膜蛋白分泌出去它的天然结构会发生变化,可能导致没有功能,但老板想要做,说是成功了可以制备抗体,我自己是一点底没有啊,希望你能对我的信号肽选择上再给些建议,非常感谢
11楼2012-03-22 21:34:26
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十口心思

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
若然飞翔: 金币+2, 有帮助 2012-03-24 14:25:50
西瓜: 金币+3, Good! 2012-03-25 14:15:27
不必纠结于信号肽,用常用穿膜的,文献里常用的就行。 这不是决定表达量的关键因素,是优化因素。要制备抗体,估计你老板是要做全人抗体。要是做小鼠的,做肽段就行,更不用纯化了。但现在也有不用纯化就可以制备抗体的办法。R&D的蛋白挺全的,你直接买吧。
12楼2012-03-23 22:56:19
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