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若然飞翔新虫 (初入文坛)
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[求助]
利用CHO进行分泌表达
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Sample Text 我想利用CHO细胞分泌表达一个膜蛋白，从上游构建开始，我该如何选择可以在CHO中进行高效表达的载体?如果使用pCDNA3.1,启动子，增强子我该如何处理？如何选择信号肽啊？刚开始接触，有太多不明白的地方了，请大家帮帮忙 |
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 【分子生物】EPI帖 |
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若然飞翔
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6楼2012-03-21 13:37:23
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【答案】应助回帖
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首先，完整的膜蛋白是不可能分泌表达的（你是指将膜蛋白表达在CHO细胞的细胞膜上吧？）。既然是膜蛋白，就用它自身的信号肽就好了。 表达时载体的确很重要，但也得分情况的: 如果你是想构建稳定的细胞株，那么你可以考虑用pcDNA3.1，也可以考虑用invitrogen的FlP-IN系统，更容易获得高表达细胞株； 如果是做瞬时表达，那么建议你用invitrogen的MembranePro™ Functional Protein Expression (FPE) System。 |
2楼2012-03-19 21:36:01
若然飞翔
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3楼2012-03-20 08:41:10
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4楼2012-03-21 08:01:57
