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zd_seu

金虫 (小有名气)

[求助] 用磷钨酸负染的脂质体的电镜图已有3人参与

用薄膜分散法制备了空白脂质体。
具体操作如下:
100mg大豆卵磷脂,10mg胆固醇,溶于5ml氯仿/甲醇的混合溶液中(4:1),置于250ml圆底烧瓶中,超声2min,35°c旋蒸1h,然后再干燥器中干燥1h。注入5ml40°C去离子水,35°C水浴中剧烈震荡10min,浸入水中15min,最终剧烈摇晃10min,置于35°c水浴中2h,完成膨胀过程。然后4°c冰箱冷藏。

配置了1%的磷钨酸溶液,对制备的脂质体进行了负染,得到的电镜图如下:
请问是否生成了脂质体?还有就是负染方法是否不对?我看到有的文献离提到,需要用NaOH将磷钨酸溶液的pH调节至中性。

另外,关于制备方法,我看到有的文献中提到需要用生理盐水或者PBS缓冲液进行水合过程,是否也会影响制备出脂质体的形貌。

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xxfan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你好 你的脂质体样品 在铜网染色后 是不是放了好几天才去拍的TEM?
感觉干的有些过度
Nothingisimpossible!
2楼2014-09-23 22:09:41
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zd_seu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xxfan at 2014-09-23 22:09:41
你好 你的脂质体样品 在铜网染色后 是不是放了好几天才去拍的TEM?
感觉干的有些过度

现在染色的,现在好一点了,估计也是当时样品做的不好。
3楼2014-09-24 12:56:24
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rayleell

金虫 (小有名气)

请问楼主现在还在做脂质体吗?请问楼主的制备方法就是这样,之后不用经过任何减小粒径的操作?脂质体体还不沉能保持稳定?脂质体新手求交流
4楼2016-05-26 09:12:04
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清风自来魏

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主的磷钨酸的染色剂是将1克的磷钨酸溶于99克的水么?
5楼2017-01-04 20:52:10
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zd_seu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 清风自来魏 at 2017-01-04 20:52:10
请问楼主的磷钨酸的染色剂是将1克的磷钨酸溶于99克的水么?

1%浓度就是这样,我一般溶解在PBS里面,然后用浓氢氧化钠调节至中性。
6楼2017-01-05 11:14:27
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Andy6261

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 清风自来魏 at 2017-01-04 20:52:10
请问楼主的磷钨酸的染色剂是将1克的磷钨酸溶于99克的水么?

应该是1g溶于100g水中吧
7楼2018-04-18 18:54:30
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Andy6261

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zd_seu at 2017-01-05 11:14:27
1%浓度就是这样,我一般溶解在PBS里面,然后用浓氢氧化钠调节至中性。...

为什么要调至中性呢 ?
8楼2018-04-18 18:56:04
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