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壳聚糖纳米粒透射观察-负染和不染(磷钨酸)的差别?
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如题: 在壳聚糖纳米粒的透射观察中,有的文献有进行磷钨酸负染,有的没有; 得出来的结果规律一般是这样的:有负染的壳聚糖纳米粒表现为白色点,没有负染的壳聚糖表现为黑色点。请问这个有什么差别吗?到底为什么会这样子呢?求解额,求助呀! 下面列出相关依据: 白色点: 载基因壳聚糖纳米粒的初步研究 四川大学硕士论文 2005; 低分子量壳聚糖纳米粒的制备及其体内分布研究 黑色点: 载蛋白三甲基壳聚糖纳米粒口服给药系统的研究 载SurvivinsiRNA的壳聚糖及水溶性壳聚糖纳米粒的制备_鉴定及生物活性研 重庆大学 还有,大家购买的磷钨酸影响大吗?一般在哪买,是比较好的用来做TEM负染观察的呢?求商家! |
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磷钨酸用水或磷酸缓冲液配制成1%左右的溶液,用滴管一滴染色液在制好样品的铜网上,1~2分钟后,用剪成尖角的滤纸吸去染色液。再滴一滴纯水在铜网上,用滤纸吸去,反复两三次,这样是为了洗去多余的磷钨酸,然后静置干燥。然后就可以用电镜观察了。 磷钨酸中的重原子相对于有机分子中的碳氢氧氮等轻原子来说,更能阻挡(散射)电子。所以,有磷钨酸吸附(或沉积)的地方在TEM照片中看起来更黑,而有机物占据的地方看起来更亮。之所以叫“负染色”,就是因为被染“黑”的是背景和外轮廓,真正感兴趣的样品部分是“白”的。也就是说,典型的经过负染色的样品是表现为黑背景中的白区。 一般有机物并不与磷钨酸发生反应,磷钨酸只是沉积在有机物周围形成“背景”或“轮廓”。但是不是所有的磷钨酸染色都是负染色。有一些羟基和酰胺类会与磷钨酸作用,出现正染色的效果,即有些含有这些基团的有机物在TEM下看起来被染“黑”,最典型的是尼龙。 另外,有时候不成功的负染色,看到的结果也是“白底黑点”,其实虽然是做了染色的操作,但可能由于方法不对,或者样品本身的性质不适用负染色,结果跟没染是一样的。如果有机颗粒足够大,不染色时就能看到“白底黑点”。 另一方面,如果染色很弱,一般只是给有机颗粒镶上一个轮廓,如果染色剂量很大,则会出现很黑的“背景”。因此,对于很小的有机颗粒,如果染色很弱,只是一个轮廓圈,电镜放大倍数不够的时候,看起来就是一个小黑点了。就好像一个纸上画一个空心圈,站远了看也可能成一个小黑点。 楼主前面提到的“白底黑点”是哪一种情况,我这里看不到文献就不妄议了。 |
12楼2013-05-09 23:02:49
15楼2013-05-10 00:52:06
2楼2013-05-03 23:29:16
3楼2013-05-04 00:14:08
4楼2013-05-04 10:09:27
5楼2013-05-04 16:39:21
6楼2013-05-04 20:37:29
7楼2013-05-05 00:10:04
8楼2013-05-05 09:08:16
9楼2013-05-09 01:08:47
10楼2013-05-09 10:57:20
11楼2013-05-09 13:05:54
13楼2013-05-09 23:05:12
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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| 在google图片上搜了下,好像染后黑的白的都有,http://www.google.pl/search?um=1 ... sphotungstic%20acid |
14楼2013-05-10 00:47:45
16楼2013-05-10 09:06:37
17楼2015-07-13 17:08:58













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