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sgn311

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助液相测定β-胡萝卜素的保留时间问题 已有1人参与

最近在用液相测定油脂中的β-胡萝卜素,柱子是刚买的新柱子,型号Venusil XBP C18,5微米,4.6*150mm。样品是用正己烷溶解的,流动相甲醇:乙腈(9:1),柱温35度,流速1.2ml/min,450nm检测。
       之前是用250mm的柱子做的,保留时间太长85min左右,因而采用国标上的条件用短柱子做,但是现在保留时间特别诡异。今天做了三次样,第一次是我的样保留时间91分钟,第二次是标品76分钟,第三次是重复自己的样,结果变成了68分钟,期间一切正常,柱压也很稳定,本人菜鸟一名,还望各位大侠指点迷津吧,不甚感激。
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

★ ★
soundhorizo: 金币+2 2012-06-27 23:12:03
引用回帖:
4楼: Originally posted by sgn311 at 2012-03-10 14:00:23:
我打算用适合的溶剂重新溶解下样品试试,我的图谱中就只有那一个峰的,所以应该不存在第二针中有第一针的峰。多谢了

我的意思是你有没有第一针没有出峰,然后以后的每针都是前一针的峰的情况。先换溶剂溶解下看看吧。可以加个柱温箱。
6楼2012-03-12 10:53:29
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zhrmghgmn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2 2012-06-27 23:11:53
可能的原因:
1、室温的变化。
2、系统未达到平衡。
3、流动相脱气不够彻底。
4、色谱柱被污染。
2楼2012-03-10 08:48:25
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先你得确定流动相是否平衡好了,其次你是否找对峰了?另外,一般正己烷对C18柱子的填料有一定影响,它好像是会部分吸附……好好平衡一下流动相再进样看看。还有,跑一针时间长点的,看你样品出峰2倍时间内是否还有别的峰。也许是你前一针的峰还没跑出来,你现在看的每个峰都是前一针的峰啊!
3楼2012-03-10 09:53:45
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sgn311

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xxaijwd at 2012-03-10 09:53:45:
首先你得确定流动相是否平衡好了,其次你是否找对峰了?另外,一般正己烷对C18柱子的填料有一定影响,它好像是会部分吸附……好好平衡一下流动相再进样看看。还有,跑一针时间长点的,看你样品出峰2倍时间内是否还 ...

我打算用适合的溶剂重新溶解下样品试试,我的图谱中就只有那一个峰的,所以应该不存在第二针中有第一针的峰。多谢了
4楼2012-03-10 14:00:23
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