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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » 请教各位一个关于EDC/NHS偶联的问题
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xd19881206

新虫 (小有名气)
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楼: Originally posted by wubo_magic at 2012-03-06 20:47:54:
推荐一本书 《bioconjugation techniques》.可以当bible用了。

thanks！
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11楼2012-03-06 20:58:40
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xd19881206

新虫 (小有名气)
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楼: Originally posted by bioalchem at 2012-03-06 08:43:36:
个人以为2步更好，因为蛋白本身既有羧基也有氨基；关于PH问题，不一定酸性，至少PH=7.4的缓冲液中可以反应，只要检验结果符合预定目标就行。欢迎指正

想得到活性酯中间体的结构，不知道行不行啊。
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12楼2012-03-06 21:00:21
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-07-03 09:49:33
引用回帖:
7楼: Originally posted by wubo_magic at 2012-03-06 20:47:54:
推荐一本书 《bioconjugation techniques》.可以当bible用了。

我也郑重推荐这本书，建议下载这本书当做工具书
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13楼2012-03-07 09:39:02
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xd19881206

新虫 (小有名气)
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楼: Originally posted by kaokao519 at 2012-03-06 12:10:04:
可以通过两步，第一步加入MES缓冲液，将PH调为5-6，当第二步反应时加入磷酸盐缓冲液，PH调为7.2-7.5

看文献说NHS-ester不稳定，容易水解，那在水溶液中产生的活性酯会不会也水解掉了？
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14楼2012-03-07 10:19:11
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xd19881206

新虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by liuanan at 2012-03-07 09:39:02:
我也郑重推荐这本书，建议下载这本书当做工具书

正在学习，谢谢
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15楼2012-03-07 10:19:35
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xd19881206

新虫 (小有名气)
★
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-07-03 09:49:44
引用回帖:
14楼: Originally posted by xd19881206 at 2012-03-07 10:19:11:
看文献说NHS-ester不稳定，容易水解，那在水溶液中产生的活性酯会不会也水解掉了？

我又想了下是不是可以这样理解：在水溶液中NHS-ester生成与水解反应存在竞争关系，当达到一定平衡后就比较稳定了，在有氨基存在的条件下，氨基与活性酯生成酰胺键结构。对不对？
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16楼2012-03-07 10:41:51
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晴朗的影子

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-07-03 09:49:52
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8楼: Originally posted by xd19881206 at 2012-03-06 20:55:49:
表面检测NHS-ester结构是用ATR红外检测吗？ATR红外貌似检测薄膜表面比较好。对于球的表面反应不知道怎么检测呢？

对的。我看到过就是用红外检测基片上的NHS酯。不过你做的球，上面的中间体特殊基团应该也是存在的，不知道有没有类似的方法测量
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17楼2012-03-07 11:06:26
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晴朗的影子

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
16楼: Originally posted by xd19881206 at 2012-03-07 10:41:51:
我又想了下是不是可以这样理解：在水溶液中NHS-ester生成与水解反应存在竞争关系，当达到一定平衡后就比较稳定了，在有氨基存在的条件下，氨基与活性酯生成酰胺键结构。对不对？

应该差不多是这样。不过NHS-ester稳定性不够好，我看文献中一般是活化0.5-1.5h，然后直接加入氨
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18楼2012-03-07 11:08:13
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皮皮1871

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-07-03 09:50:00
请问，如果不加EDC, 只加NHS能反应吗？
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不管梦想有多远，不停地走下去
19楼2012-07-03 08:48:12
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mengzhiqin

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
mwyuer: 金币+1, 感谢新虫回帖交流，欢迎常来生物材料版 2012-09-12 08:10:49
现在MES溶液pH5.8中加EDC、NHS活化，再在PBS溶液pH7.4中偶联
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xd19881206
20楼2012-09-11 20:39:27
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