24小时热门版块排行榜    

查看: 2750  |  回复: 6

alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧

[求助] 葡聚糖凝胶过滤层析中层析柱填料的问题

看书上说G-50能够用来分离分子量500——10000的蛋白质和肽,但是层析柱的规格,填料的用量怎么选择
回复此楼
研究僧
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baodongq

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

2楼2012-03-05 16:18:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧

引用回帖:
: Originally posted by baodongq at 2012-03-05 16:18:48:
采用凝胶过滤层析,当你的填料选定的时候,柱子选择国产锦华或进口的都行,一般细而且长的比较好。比如26X60,可以线性放大的。填料的多少要看你的处理量是多少,一般凝胶层析的上样量比较少,10%已足以!

分出来分子量只跟填料的种类有关吗?
研究僧
3楼2012-03-05 16:20:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baodongq

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

4楼2012-03-05 16:34:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧

引用回帖:
: Originally posted by baodongq at 2012-03-05 16:34:53:
看你的样品是什么,纯度如何了,你选用填料的分离范围不同,那分离出来的组分分子量也会不同。

就是细胞破碎液,经过蛋白酶解以后,三氯乙酸沉淀后的清液
研究僧
5楼2012-03-05 16:58:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先楼主说的填料是凝胶过滤,所以选择柱子当然是越长越好,填料的用量要根据你的上样量来决定,一般上样量不超过5%
6楼2012-03-05 17:46:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

上样量10%太大了,最多只能2%的柱床体积(分子筛主要考虑样品体积),当然,如果要求低或者目的物质与杂质分子量差异极大(10倍)就可以增加上样量。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2012-03-05 22:42:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 alqfren 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 15/750 2026-09-01 12:23 by icm639
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
信息提示
请填处理意见