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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 葡聚糖凝胶过滤层析中层析柱填料的问题
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alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧

[求助] 葡聚糖凝胶过滤层析中层析柱填料的问题

看书上说G-50能够用来分离分子量500——10000的蛋白质和肽，但是层析柱的规格，填料的用量怎么选择
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研究僧
1楼 2012-03-05 15:14:13
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baodongq

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
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2楼2012-03-05 16:18:48
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alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧
引用回帖:
楼: Originally posted by baodongq at 2012-03-05 16:18:48:
采用凝胶过滤层析，当你的填料选定的时候，柱子选择国产锦华或进口的都行，一般细而且长的比较好。比如26X60，可以线性放大的。填料的多少要看你的处理量是多少，一般凝胶层析的上样量比较少，10%已足以！

分出来分子量只跟填料的种类有关吗？
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研究僧
3楼2012-03-05 16:20:11
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baodongq

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
4楼2012-03-05 16:34:53
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alqfren

木虫 (正式写手)

研究僧
引用回帖:
楼: Originally posted by baodongq at 2012-03-05 16:34:53:
看你的样品是什么，纯度如何了，你选用填料的分离范围不同，那分离出来的组分分子量也会不同。

就是细胞破碎液，经过蛋白酶解以后，三氯乙酸沉淀后的清液
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研究僧
5楼2012-03-05 16:58:45
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先楼主说的填料是凝胶过滤，所以选择柱子当然是越长越好，填料的用量要根据你的上样量来决定，一般上样量不超过5%
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6楼2012-03-05 17:46:07
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
上样量10%太大了，最多只能2%的柱床体积（分子筛主要考虑样品体积），当然，如果要求低或者目的物质与杂质分子量差异极大（10倍）就可以增加上样量。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2012-03-05 22:42:46
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