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紫菱Kitty

金虫 (小有名气)

[求助] 求助!关于凝胶柱的问题

看到一篇文献要把酶从粗酶液里面提取出来制成酶粉。先做盐析,再过了快速流动琼脂糖凝胶柱和聚丙烯酰胺凝胶柱。过第一个柱子的时候还用了氯化钠梯度洗脱以及用了考马斯亮蓝测吸光度。请问过这两个柱子的目的是什么啊?还有那个氯化钠洗脱是什么意思?
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梦随风万里,几度洪辰来去。人面桃花长相忆。又是一年春华成秋碧,莫叹明月笑多情。
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
凝胶柱起到分子筛的作用,过这两根柱子的目的应该是除去杂质。

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2楼2012-03-02 16:37:21
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紫菱Kitty

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-02 16:37:21:
凝胶柱起到分子筛的作用,过这两根柱子的目的应该是除去杂质。

那个氯化钠梯度洗脱是什么意思?就是那个快速流动琼脂糖凝胶柱。
梦随风万里,几度洪辰来去。人面桃花长相忆。又是一年春华成秋碧,莫叹明月笑多情。
3楼2012-03-02 17:27:57
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
紫菱Kitty(金币+5): ★★★很有帮助 2012-03-03 13:09:02
梯度洗脱我觉得没有什么意义,凝胶柱很少用梯度的,要带着怀疑的态度做科学研究,是谁不是说过一句话“尽信书不如无书”

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4楼2012-03-02 23:48:21
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紫菱Kitty

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by lihuan0525 at 2012-03-02 23:48:21:
梯度洗脱我觉得没有什么意义,凝胶柱很少用梯度的,要带着怀疑的态度做科学研究,是谁不是说过一句话“尽信书不如无书”

呃,不是这个意思,我要做文献报告,就看到了一篇文献上讲梯度洗脱,但是我过柱子是不用的。所以才想问问。
梦随风万里,几度洪辰来去。人面桃花长相忆。又是一年春华成秋碧,莫叹明月笑多情。
5楼2012-03-03 00:18:39
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

楼主请先了解分子筛、阴离子/阳离子交换、疏水层析这三种常用的蛋白质分离方法。

FF=fast flow是层析柱的一种,琼脂糖是层析柱的填料支架,氯化钠多用于做离子交换柱层析的洗脱剂。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2012-03-03 01:37:32
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zzqbaidu

木虫 (正式写手)

梯度洗脱是除去杂蛋白的吧
帮忙点下我的网站http://www.yayadan.com 欢迎光临!
7楼2012-03-03 15:19:10
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

主要是除去杂质,梯度洗脱是尽可能多的去除杂质将目标蛋白和杂质分离开来吧。
8楼2012-05-11 16:12:16
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