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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳问题
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一笑而过0987

铜虫 (正式写手)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳问题

最近做的琼脂糖凝胶电泳实验出了问题很苦恼，marker条带清晰，目的条带有的清晰有的没有，引物二聚体非常多，比目标条带还清楚。
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1楼 2012-03-01 12:17:05
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一笑而过0987

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by manli881107 at 2012-12-18 10:41:27
你好楼主，我最近也出现了你同样的问题～我跑了一下DNA浓度，很好很亮，可是PCR产物就是很弱，甚至没有，二聚体也很多很亮，我找不到是什么原因，请问你是怎么解决这个问题的呢？急！

实验做完了，我忘了当时是怎么解决的了，当时尝试了很多办法，温度梯度还有降落法。还换了试剂。
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14楼2012-12-20 23:04:38
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karin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-03-01 17:04:12
目的条带不清晰可能是你的PCR产物浓度低，可以加大上样量看看到底有没有目的条带。你可以把PCR体系中引物量降低，你的引物加的过多了，不过也有可能是你的引物本身就容易形成二聚体，先降低量看看吧。由你的描述看，你的
PCR体系或扩增程序需优化。
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坚持就是胜利
2楼2012-03-01 12:28:01
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一笑而过0987

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by karin at 2012-03-01 12:28:01:
目的条带不清晰可能是你的PCR产物浓度低，可以加大上样量看看到底有没有目的条带。你可以把PCR体系中引物量降低，你的引物加的过多了，不过也有可能是你的引物本身就容易形成二聚体，先降低量看看吧。由你的描述看 ...

加样量增加了二倍，还是和原来一样。
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3楼2012-03-01 18:01:20
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一笑而过0987

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 一笑而过0987 at 2012-03-01 18:01:20:
加样量增加了二倍，还是和原来一样。

按照同样的体系，之前做过，结果还挺好的，最近就这样了。
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4楼2012-03-01 18:02:54
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